细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称 GL-261小鼠胶质细胞瘤 英文名称 GL-261:GL261 产品货号 A01X1052 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳; 生长特性 贴壁生长 细胞形态 成纤维细胞样 产品种属 小鼠 冻存条件 无血清冻存液,液氮储存 组织来源 胶质瘤 用途 仅供科研研究实验 商品详情:
产品名称
GL-261小鼠胶质细胞瘤
英文名称
GL-261:GL261
产品货号
A01X1052
培养条件
气相:95%空气+5%二氧化碳;
生长特性
贴壁生长
细胞形态
成纤维细胞样
产品种属
小鼠
冻存条件
无血清冻存液,液氮储存
组织来源
胶质瘤
用途
仅供科研研究实验
细胞别称:GL-261;小鼠胶质瘤细胞
种属来源:小鼠
年龄性别:
组织来源:胶质瘤
生长特性:贴壁生长
细胞形态:成纤维细胞样
背景简介:1939年3-甲基胆蒽颅内注射诱导Gl261肿瘤,经C57BL/6小鼠体内培养,经同基因小鼠株连续移植维持,于1990年代中期建立体外生长细胞培养;文献中描述了携带TP53和KRAS突变的细胞
生物等级:1
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:
保藏机构:
培养基:90% DMEM+10% FBS+双抗
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
9号染色体开放阅读框152抗体 C9orf152
肿瘤坏死因子受体超家族成员27抗体 Anti-EDA2R 磷酸化蛋白酶活化受体4抗体 Anti-Phospho-PAR4 (Thr163)
丙型肝炎病毒NS5A反式蛋白13抗体 NOLC1
磷酸化间变型瘤激酶抗体 phospho-ALK (Tyr1586)
P53应答基因蛋白5抗体 Anti-WFDC5 痛觉调节肽NPFF抗体 Anti-NPFF/FMRFamide
半胱天冬酶-3酶原抗体 Anti-pro-caspase-3 突触结合蛋白10抗体 Anti-Synaptotagmin X
DPY19L3蛋白抗体 DPY19L3
环指蛋白190抗体 Anti-RNF190 突触结合蛋白4抗体 Anti-Synaptotagmin-4人核因子κB(NF-κB)elisa分析检测试剂盒 HumanNF-κBELISAKit
组织蛋白酶H轻连抗体 Cathepsin H light chain
大鼠β防御素2(DEFB2)elisa分析检测试剂盒 DEFB2 ELISA kit
鱼透明质酸(HA)elisa检测试剂盒 大鼠谷胱甘肽S转移酶θ1(GSTθ1)elisa检测试剂盒
细胞基质金属(MMP-9)活性荧光定量检测试剂盒 人脯氨酸肽酶(PEPD)elisa检测试剂盒
LIM源框蛋白1抗体 LIM1
GL-261小鼠胶质细胞瘤促凋亡Bik蛋白抗体 Bik
原钙粘蛋白γA12抗体 PCDHGA12
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。