细胞培养操作：
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
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产品名称
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HBE135-E6E7人支气管上皮细胞
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英文名称
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HBE135-E6E7:HBE135E6E7
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产品货号
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A01X725
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培养条件
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气相：空气，95%；CO2，5%,
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样；卵圆形
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产品种属
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人
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冻存条件
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冻存液：55%DM/F12+40%FBS+5%DMSO
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组织来源
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肺；支气管
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情：
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样；卵圆形
冻存条件
冻存液：55%DM/F12+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养方案A（默认）
生长培养基:
HBE135-E6E7 细胞培养基
培养条件:
气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 The HBE135-E6E7 cell line was derived from normal bronchial epithelium taken from a man undergoing lobectomy for squamous cell carcinoma. Cells from the primary explant in their first passage were infected with the recombinant retrovirus LXSN16E6E7 containing the human papilloma virus (HPV) E6E7 gene. Cells were selected in the presence of 0.4 mg/mL G418
年龄（性别） 男性,；54岁
组织来源 肺；支气管
细胞类型 转化细胞系
生物等级 BSL-2
倍增时间 24-30 hours
保藏机构 ATCC; CRL-2741
公司正在出售的产品：
6号染色体开放阅读框57抗体 C6orf57 ABH5蛋白抗体 ALKBH5
源盒基因HOXA6蛋白抗体 HOXA6 脱支酶源蛋白DBR1抗体 DBR1
角蛋白相关蛋白15.1抗体 KAP15.1 精子顶体膜相关蛋白3抗体 SPACA3
内质网蛋白RER1抗体 RER1 胚胎外精子源蛋白1抗体 ESX1
胰高血糖素抗体 Glucagon 异质核糖核蛋白M3-M4抗体 hnRNP M3-M4
RNA结合蛋白23抗体 RBM23 SC35蛋白抗体 SC35
GalNAc-T4 抗体 GALNT4 G蛋白结合蛋白2抗体 GBP2
多腺苷二磷酸多聚酶/多聚ADP-核糖聚合酶1单克隆抗体 PARP1 芳香乙酰胺脱乙酰基酶抗体 AADAC细胞色素P450亚酶CYP3A1（BROD）活性荧光定量检测试剂盒 小鼠90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)elisa检测试剂盒
共济失调性眼球运动功能丧失相关蛋白AOA1抗体 Aprataxin
DNA吖啶橙（acridine orange）荧光检测试剂盒 大鼠戊糖素(Pentosidine)elisa检测试剂盒
牛羧化不全骨钙素(ucOC)elisa分析检测试剂盒 血液二胺氧化酶（DAO）活性比色法定量检测试剂盒
小鼠抗IgE受体抗体elisa分析检测试剂盒 大鼠弹性蛋白酶3B(ELA3B)elisa检测试剂盒
组蛋白H3-K56（mono/di）甲基化检测试剂盒 小鼠叉头框蛋白P3(FOXP3)elisa检测试剂盒
HBE135-E6E7人支气管上皮细胞革兰氏阴性菌蛋白提取试剂盒100T 冰冻切片组蛋白H3-K9甲基化组化检测试剂盒
连接蛋白JPH3抗体 Junctophilin 3
细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。
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