细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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HC11小鼠乳腺上皮细胞
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英文名称
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HC11:HC11
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产品货号
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A01X1056
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样
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产品种属
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小鼠
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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组织来源
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乳腺
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:��气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:6
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 This clone was isolated by transfection from the parental cell line COMMA-1D. It was selected for its prolactin induction of beta-casein protein.
年龄(性别) 雌性,1年
组织来源 乳腺
细胞类型 自发永生化细胞
生物等级 1
倍增时间 ~50-80小时 (DSMZ)
基因表达情况 Undifferentiated cells express Lgals1, Ran, Jam-A and Bmpr1a Differentiated cells express Id1, Nfkbiz, Trib 1, Rps21, ler3
保藏机构 ATCC; CRL-3062 DSMZ; ACC-780
公司正在出售的产品:
人白介素3(IL-3)elisa分析检测试剂盒 HumanInterleukin3ELISAKIT
果菜甲酸比色法定量检测试剂盒 小鼠C4结合蛋白α(C4BPα)elisa检测试剂盒
新德里超级金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)elisa分析检测试剂盒 NDM-1 ELISA kit
眼部白化病相关蛋白OA1/蛋白偶联受体143抗体 OA1
精子形成相关凋亡蛋白7抗体 Anti-TSARG7 蛋白激酶A抗体 Anti-PKA/PKAcat/PKACB
大鼠纤维蛋白原降解产物(FDP)elisa检测试剂盒 细胞PAR-2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
9号染色体开放阅读框84抗体 C9orf84
肝糖原磷酸化酶抗体 Anti-PYGL 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗体 Anti-phospho-CK II beta (Ser209)线粒体二羧酸载体蛋白11抗体 SLC25A11
无精症缺失基因1抗体 DAZ1
Cy5标记的小鼠抗牛IgG H&L Mouse Anti-Bovine IgG H&L / Cy5
人CC趋化因子受体1(CCR1)elisa分析检测试剂盒 HumanCCR1ELISAKit
小鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)elisa分析检测试剂盒 OVAsIgGELISAKit
大鼠SHC转化蛋白1(SHC1)elisa分析检测试剂盒 SHC1 ELISA kit
HC11小鼠乳腺上皮细胞人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa分析检测试剂盒 Casp-12ELISAKit
转录因子MAFF抗体 MAFF
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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