细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称 HUCCT1人胆管癌细胞 英文名称 HUCCT1:HUCCT1 产品货号 A01X781 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%, 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 人 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 胆管,腹水转移 用途 仅供科研研究实验 商品详情:
产品名称
HUCCT1人胆管癌细胞
英文名称
HUCCT1:HUCCT1
产品货号
A01X781
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%,
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
胆管,腹水转移
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:2
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
年龄(性别) 男性;56岁
组织来源 胆管,腹水转移
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肝胆癌细胞
生物等级 BSL-1
倍增时间 ~55 hours
保藏机构 JCRB; JCRB0425 RCB; RCB1960 TKG; TKG 0389
γ-谷氨酰转移酶轻链2抗体 GGTLC2
胸腺基质细胞**素-1抗体(人) Anti-TSLP (human) Pan ras抗体 Anti-Pan-ras
活化T细胞核因子5蛋白抗体 NFAT5
白血病抑制因子抗体 HLF
等电压依赖性阴离子通道抗体 Anti-VDAC 硫酸软骨素蛋白多糖4/黑色素瘤相关蛋白抗体 Anti-NG2/CSPG4
骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子) Anti-OPGL/RANKL/ODF 脂肪酸转运蛋白6抗体 Anti-SLC27A6/ACSVL2
嗅觉受体51A7抗体 OR51A7
环指蛋白146抗体 Anti-RNF146 T细胞受体α抗体 Anti-TCR alpha人肌抑素(MSTN)elisa分析检测试剂盒 HumanMyostatinELISAKit
人促甲状腺素释放(TRH)elisa分析检测试剂盒 TRHELISAKIT
大鼠白介素3(IL-3)elisa分析检测试剂盒 IL-3 ELISA KIT
人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)elisa检测试剂盒 血液异戊二烯焦磷酸异构酶(isopentenyl pyrophosphate isomerase)活性比色法定量检测试剂盒
小鼠维生素D(VD)elisa分析检测试剂盒 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 TRACP elisa检测试剂盒
角蛋白KRT83抗体 KRT83
HUCCT1人胆管癌细胞细胞核酸结合蛋白抗体 CNBP/ZNF9
植物钙调素(CaM)elisa分析检测试剂盒 CaM ELISA Kit
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。