细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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JEG-3人绒毛膜癌细胞
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英文名称
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JEG-3:JEG3
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产品货号
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A01X798
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样
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产品种属
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人
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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组织来源
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胎盘病变;绒毛膜癌
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 JEG-3细胞是一株超三倍体人类细胞株。JEG-3细胞的典型染色体数为71,发生率为34%,多倍体率为2.6%。t(4;11)(p15;q13),i(13q),t(10p15q),del(18)(q21)和6个其他标记在大多数细胞中常见,另有两个标记在一些细胞中可见,在一个N14和两个N22中可见大卫星。N2、N5和N9有4个拷贝,而N7、N13、N18、N21和X为单拷贝,Q-带检测法可以检测到单个Y染色体。
年龄(性别) 男
组织来源 胎盘病变;绒毛膜癌
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 其它肿瘤细胞
生物等级 1
倍增时间 ~24-36 hours
致瘤性 Yes, in nude mice; forms malignant tumor consistent with choriocarcinoma.
基因表达情况 human chorionic gonadotropin (hCG), human chorionic somatomammotropin (placental lactogen); progesterone
保藏机构 ATCC; HTB-36 BCRC; 60428 BCRJ; 0123 DSMZ; ACC-463 ECACC; 92120308
公司正在出售的产品:
SARA蛋白抗体 SARA SMCR7蛋白抗体 SMCR7
Ⅰ型补体受体重组兔单克隆抗体 CD35 AF680标记的环氧合酶2/前列腺素内过氧化物合成酶2抗体 Cyclooxygenase 2, Alexa Fluor 680 conjugated
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脑特异性跨膜蛋白抗体 NETO2 嘌呤嘧啶核酸内切酶2抗体 APEX2(PROTEASE)定性检测试剂盒 兔p53(p53)elisa检测试剂盒
人二胺氧化酶(DAO)elisa分析检测试剂盒 DAOELISAKit
纯化线粒体总RNA萃取试剂盒 大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)elisa检测试剂盒
NZCYM培养基NZCYM Broth 100g 通用型钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒
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JEG-3人绒毛膜癌细胞大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)elisa检测试剂盒 HISTONE H3蛋白共沉淀分析试剂盒
猴补体片断3b(C3b)elisa分析检测试剂盒 C3b ELISA kit
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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