细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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KU812人外周血嗜碱性白血病细胞
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英文名称
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KU812:KU812
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产品货号
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A01X815
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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生长特性
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悬浮细胞
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细胞形态
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骨髓母细胞样
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产品种属
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人
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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组织来源
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器官:外周血; :慢性髓性白血病; 细胞类型:嗜碱性
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
生长特性 悬浮细胞
细胞形态 骨髓母细胞样
生长培养基 RPMI-1640+20% FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 3×10^5个/mL
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 KU812细胞是从一位慢性髓性白血病患者暴发期的外周血建立的细胞株,KU812细胞至少有一个Ph1(费城)染色体。KU812细胞有一些嗜碱性细胞的标记(如Fc受体、碱性颗粒,**组胺),而标记阴性。
年龄(性别) 男;38岁
组织来源 器官:外周血; :慢性髓性白血病; 细胞类型:嗜碱性
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 白血病细胞
生物等级 1
倍增时间 ~40-60 hours
抗原表达情况 CD3; Homo sapiens alanyl
(membrane) aminopeptidase (ANPEP, CD13); Homo sapiens
保藏机构 ATCC; CRL-2099 BCRC; 60502
BCRJ; 0261 DSMZ; ACC-378 ECACC; 90071807
公司正在出售的产品:
B细胞迁移基因4抗体 BTG4
L选择素抗体 Anti-L-Selectin/CD62L 环指蛋白133抗体 Anti-RNF133
脂肪分解刺激脂蛋白受体抗体 LSR/Lipolysis Stimulated Lipoprotein
Receptor
内质网脂质转运相关蛋白2抗体 SPFH2
溶质载体家族蛋白22成员5抗体 Anti-Slc22a5 磷酸化酶β抗体 Anti-PHKB
N-乙酰转移酶8B抗体 Anti-NAT8B 锌指蛋白340抗体 Anti-ZBTB46/ZNF340/BTBD4
猪瘟病毒抗体 CSFV
血小板源性生长因子受体A抗体(PDGFRα) Anti-PDGFRA 金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体(N端) Anti-TIMP-1(NT)锌指蛋白495C抗体 ZSCAN5C
碳酸酐酶4抗体 CAIV/Carbonic Anhydrase IV
Alexa Fluor 350标记羊IgG(型对照) Goat IgG / AF350
大鼠抗弓形虫IgM抗体elisa分析检测试剂盒 Rat anti-toxoplasmosis
IgM Antibody ELISA kit
小鼠III型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)elisa分析检测试剂盒 PⅢNPELISAKit
鸟类催乳素(PRL/LTH)elisa分析检测试剂盒 PRL/LTH ELISA Kit
KU812人外周血嗜碱性白血病细胞人白介素2(IL-2)elisa分析检测试剂盒 HumanIL-2ELISAkit
猪乙脑病毒包膜蛋白抗体 JEV E
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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