细胞培养操作： 1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
产品名称 LN229人胶质瘤细胞 英文名称 LN229:LN229 产品货号 A01X820 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%, 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 人 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 大脑/右额叶顶枕叶皮质 用途 仅供科研研究实验 商品详情：
产品名称
LN229人胶质瘤细胞
英文名称
LN229:LN229
产品货号
A01X820
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%,
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
大脑/右额叶顶枕叶皮质
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
温度：液氮
培养方案A（默认）
生长培养基:
DMEM＋5% FBS＋1% P/S
培养条件:
气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:5
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 The LN-229 cell line was Established in 1979 from cells taken from a patient with right frontal parieto-occipital glioblastoma [PubMed. 10416987].
年龄（性别） 女性；60岁
组织来源 大脑/右额叶顶枕叶皮质
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 胶质母细胞瘤细胞
生物等级 BSL-1
倍增时间 ~31 hours
致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.
保藏机构 ATCC; CRL-2611
人淀粉状蛋白β(A4)前体蛋白结合家族B成员1(FE65)elisa分析检测试剂盒 HumanFE65ELISAkit
细胞单胺氧化酶（MAO）总活性比色法定量检测试剂盒 人DAB2互作蛋白(DAB2IP)elisa检测试剂盒
仓鼠白介素6(IL-6)elisa分析检测试剂盒 IL-6 ELISA Kit
蛋氨酸亚砜还原酶B3抗体 MSRB3
肿瘤坏死因子α诱导蛋白8抗体 Anti-TNFAIP8 视黄醇脱氢酶11/丙型肝炎核心蛋白抗体 Anti-RDH11
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa分析检测试剂盒 小鼠前列腺素G/H合酶1(PTGS1)elisa检测试剂盒
脂肪酸去饱和酶6抗体 FADS6
核凋亡诱导因子蛋白1 Anti-NAIF1 protein 磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体 Anti-Phospho-Smad2(Ser245/250/255)ENTHD1蛋白抗体 Epsin2B
脱氧辅合酶蛋白抗体 DHPS
APC标记的兔抗鸡IgM Rabbit Anti-Chicken IgM / APC
人β2糖蛋白(β2-GP)elisa分析检测试剂盒 β2-GPELISAKit
猪白介素12(IL-12/P40)elisa分析检测试剂盒 IL-12/P40ELISAKIT
大鼠复制蛋白A 70kDaDNA结合亚基(RPA1)elisa分析检测试剂盒 RPA1 ELISA kit
LN229人胶质瘤细胞豚鼠白介素1β(IL1B)elisa分析检测试剂盒 IL1BELISAkit
甲基化CpG结合域蛋白3样1抗体 MBD3L1
细胞传代培养操作步骤： （1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。 （2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。 （3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 （4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。 （5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。 （6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。 （7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。 （8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 （9）细胞冻存。