细胞培养操作：
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
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产品名称
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LNCaP clone FGC人前列腺癌细胞
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英文名称
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LNCaP clone
FGC:LNCaP clone FGC
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产品货号
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A01X822
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培养条件
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气相：空气，95%；CO2，5%
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样
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产品种属
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人
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冻存条件
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冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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组织来源
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前列腺；左锁骨结癌转移灶
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情：
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
注意事项 1）该细胞并不形成一致的单层，而是形成集落。（2）该细胞会使培养基快速变酸，且生长缓慢，故传代后 48 小时内不应扰动；（3）普通TC处理的培养瓶或皿不能使细胞很好的贴壁，培养难度较高，需使用 Corning 的 cellbind 细胞培养瓶 ，或者使用多聚-L-赖氨酸溶液包被过的培养皿； （4）在细胞运输途中，多数细胞会从培养瓶底分离，大片悬浮在培养基中，按照收货注意事项处理即可恢复正常。
背景描述 人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。LNCaP clone FGC细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。LNCaP clone FGC细胞并不形成一致的单层，而是形成集落，在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。LNCaP clone FGC细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。LNCaP
clone FGC细胞生长极其缓慢，传代后48小时内不应扰动。当培养瓶封包后，多数LNCaP clone FGC细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养24-48小时，以使细胞再贴壁。此后，可以换上新鲜培养液。如果需要，培养瓶内容物可以收集，300g离心15分钟，以10毫升培养液重悬并培养到一个单独的培养瓶中。
年龄（性别） 男；50岁
组织来源 前列腺；左锁骨结癌转移灶
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 前列腺癌细胞
生物等级 1
倍增时间 ~32-36 hours
致瘤性 Yes, in soft agar.Yes, the
cells are tumorigenic in nude mice.
受体表达情况 androgen receptor, positive;estrogen
receptor, positive
基因表达情况 human prostatic acid
phosphatase; prostate specific antigen
保藏机构 ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088
BCRJ; 0149 ECACC; 89110211
公司正在出售的产品：
G蛋白偶联受体120抗体 GPR120 G蛋白信号转导调节因子19抗体 RGS19
抑制蛋白结构域蛋白3抗体 ARRDC3 原钙粘附蛋白9抗体 PCDH9
嘌呤ATP受体抗体 P2Y2 鞘脂激活蛋白原抗体 PSAP
未分化胚胎干细胞转录因子1抗体 UTF1 细胞骨架蛋白C端PDLIM1抗体 PDLIM1
AF680标记的乳铁蛋白抗体 Lactoferrin, Alexa Flour 680 conjugated AF750标记的血型糖蛋白A（CD235a）抗体 Glycophorin A, Alexa Fluor 750
conjugated
泛酸激酶2抗体 PANK2 呋喃西林小鼠单抗 SEM
SQSTM1/P62单克隆抗体 SQSTM1/P62 TRIM35蛋白抗体 TRIM35
紧密连接蛋白20抗体 Claudin 20 卷曲螺旋结构域蛋白74B抗体 CCDC74B大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)elisa分析检测试剂盒 鱼胰岛素样生长因子II(IGF2)elisa分析检测试剂盒
醛固酮类还原酶家族7成员A2抗体 AKR7A2
BJ5183 人钙调素特异抗体(CAM-ab)elisa检测试剂盒
小鼠T细胞表面糖蛋白CD3
epsilon链(CD3E/T3E)elisa检测试剂盒 磷酸酶抑制剂混合物1ml
载玻片细胞EGFR 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 绵羊白蛋白(Albumin)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠细胞色素C氧化酶(COX)elisa检测试剂盒免费代测 石蜡切片组织衰老特异性早期脂褐素油性红原位间接染色试剂盒
LNCaP
clone FGC人前列腺癌细胞兔睾酮（Testoterone）elisa检测试剂盒 乳品抗坏血酸比色法定量检测试剂盒
组织相容性抗原DQB2抗体 HLA-DQB2
细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。
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