Lncap(前列腺癌细胞)

商品属性：

产品名称	Lncap(前列腺癌细胞)	英文名称	Lncap
产品货号	AXB9766	培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；
生长特性	贴壁生长	细胞形态	上皮细胞样
产品种属	人	冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
组织来源	前列腺；左锁骨结癌转移灶	用途	仅供科研研究实验

商品详情：

细胞别称；LNCaP；人前列腺癌细胞

种属来源；人

年龄性别；男；50岁

组织来源；前列腺；左锁骨结癌转移灶

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

细胞代数；10代以内

背景介绍；LNCaP细胞由HoroszewiczJS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上结细针穿刺的活体组织中分离建立的。5-α-双氢睾酮可影响该细胞的生长和酸性磷酸酶的产生。该细胞不形成均一的单层而是成簇生长，所以传代的时候要反复吹打形成单个细胞；该细胞贴壁不牢，达不到汇合状态，而且会使培养基迅速变酸；传代后48h内一定要保持培养瓶静止，如果此时挪动培养瓶，会使大部分细胞从瓶底脱落。如果出现此种情况，需要重新孵育24~48h使细胞重新贴壁，细胞贴壁后可更换培养基。

特别注意；1. LNCaP细胞长得较慢，复苏和传代后需24-48小时贴壁。该细胞贴壁不牢，仅仅轻轻地吸附在皿底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。生长很慢，传代后48小时内不应移动。2.细胞封包、寄出时，罐装运输后通常多数细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养24到48小时，以使细胞再贴壁，此后换上新鲜培养液。如仍有细胞漂浮，需将培养瓶内容物收集，800rpm离心5分钟，用新鲜培养液重悬并培养到一个6cm培养皿或T25培养瓶中。

STR位点信息；Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，11；D13S317：10，12；D16S539：11；D18S51：9，11，12；D19S433：13.2，15；D21S11：29，32.2；D2S1338：16，17；D3S1358：16；D5S818：11，12；D7S820：8.1，9.1，10.3；D8S1179：12，14；FGA：19，20；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：16，18；

使用权限；A类

细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测；无

保藏机构；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心

培养基；RPMI-1640+ FBS 10%+p/s 1%

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。
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