细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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LS180人结直肠癌细胞
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英文名称
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LS180:LS180
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产品货号
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A01X828
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%,
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样,有空泡
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产品种属
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人
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO
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组织来源
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结肠
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样,有空泡
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
DMEM+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 LS 180 is a cell exhibiting
epithelial morphology isolated from the colon of a White, 58-year-old female
patient with colorectal.
年龄(性别) 女性;58岁
组织来源 结肠
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 结肠腺癌细胞
生物等级 BSL-1
倍增时间 48-72 hours
致瘤性 Yes; Yes, in nude mice
抗原表达情况 Serologically defined colon
cancer antigen 3; Homo sapiens, expressed HLA A2, B13, B50; Blood type O
基因表达情况 carcinoembryonic antigen
(CEA); interleukin 10; interleukin 6; mucin
保藏机构 ATCC; CL-187
公司正在出售的产品:
9号染色体开放阅读框95抗体 C9orf95/NRK
线粒体DNA拓普西异构酶Ⅰ抗体 Anti-TOP1mt/TOPO Ⅰ 血小板源性生长因子受体B抗体(PDGFRβ) Anti-PDGF Receptor beta/PDGFRB
ORC4L蛋白抗体 ORC4
G蛋白偶联受体GPR155ř GPR155
锌指蛋白297B抗体 Anti-ZBTB43/ZNF297B NOMO蛋白抗体 Anti-NOMO1
丙酮酸脱氢酶E1β亚单位抗体 Anti-PDHB SNX27蛋白抗体 Anti-SNX27
乙酰化酶动力蛋白3抗体 Dynamin 3 (acetyl K604)
原癌基因R-Ras抗体 Anti-RRAS DNA结合蛋白2抗体 Anti-SATB2人骨形成蛋白4(BMP4)elisa分析检测试剂盒 HumanBMP4ELISAKit
7号染色体开放阅读框63抗体 C7orf63
大鼠P物质受体(SP-R)elisa分析检测试剂盒 SP-R ELISA Kit
细胞黑色素(MELANIN)染色试剂盒 人3-硝基酪氨酸(3-NT)elisa检测试剂盒
大鼠B细胞活化因子(BAFF)elisa检测试剂盒 小鼠末端补体复合体C5b-9(C5b-9)elisa检测试剂盒
大脑边缘系统相关膜蛋白抗体 LSAMP
LS180人结直肠癌细胞BSPRY蛋白抗体 BSPRY
非霍奇金瘤重复蛋白3抗体 NHLRC3
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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