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产品资料

MB49+LUC小鼠膀胱癌细胞荧光素酶标记

MB49+LUC小鼠膀胱癌细胞荧光素酶标记
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  • 产品名称:MB49+LUC小鼠膀胱癌细胞荧光素酶标记
  • 产品型号:A01X1073
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
MB49+LUC小鼠膀胱癌细胞荧光素酶标记公司正在出售的产品:SBC-2人小细胞肺癌 血清学定义结肠抗原1抗体 Anti-SDCG1 PE标记的兔抗鸡IgM Rabbit Anti-Chicken IgM / PE 大鼠黏着斑蛋白(VCL)elisa酶联试剂盒
产品描述

细胞培养操作:

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。


商品属性:

产品名称

MB49+LUC小鼠膀胱癌细胞荧光素酶标记

英文名称

MB49+LUC:MB49LUC

产品货号

A01X1073

培养条件

生长特性

悬浮生长

细胞形态

上皮细胞样

产品种属

小鼠

冻存条件

详见说明

组织来源

小鼠膀胱癌

用途

仅供科研研究实验

商品详情:


细胞介绍

该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。

细胞特性

1) 来源:小鼠膀胱癌

2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长

3) 含量:>1x10^6  细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途:仅供科研使用。

细胞筛选

该细胞为稳定转染Luc的细胞,随细胞传代次数的增加,其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。        

建议收到细胞后至少传3代,冻存留种后再进行筛选。

初次进行细胞筛选时,建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的培养基维持培养,若无细胞漂浮或者漂浮较少,即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的培养基继续筛选,以此类推,至高浓度为5ug/ml。若筛选过程中,漂浮细胞大于60%,则停止筛选,换成正常培养基培养,至细胞密度约80%,可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖,可停止筛选,用不含药培养基正常培养。


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细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。


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