细胞系实验步骤:
一、细胞培养准备: 生物柜的使用:确保所有接触细胞的物品都在生物柜中通过紫外,防止污染。 培养皿和培养瓶:提供细胞生长的环境,保持恒定的温度(通常为37℃)。 培养基和血清:特制的培养基包含各种营养物质,如糖、氨基酸和维生素,添加胎牛血清和双抗以提供生长因子和防止污染。 二、细胞培养过程: 细胞接收与记录:记录细胞系的相关信息,包括背景信息、传代培养、冷冻保存等。 细胞形态观察:定期检查细胞的形态和行为,确保细胞状态健康,无污染。 细胞传代:当细胞密度超过80%时进行传代,注意消化时间和条件,避免细胞损伤。 三、细胞系鉴定与维护: 细胞系鉴定:通过STR图谱确定细胞的遗传特征,防止细胞系被误认或交叉污染。 细胞保存与管理:定期进行细胞冷冻保存,确保细胞的长期存活和可用性。
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商品属性:
产品货号
A01X1077
冻存条件
无血清冻存液,液氮储存
产品分类
小鼠细胞系
产品种属
小鼠
生长特性
贴壁生长
细胞形态
成纤维细胞
英文名称
MC3T3-E1subclone 14:MC3T3E1subclone 14
组织来源
颅顶骨
商品介绍:
细胞别称:MC3T3-E1subclone 14 ;小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
种属来源:小鼠
年龄性别:新生
组织来源:颅顶骨
生长特性:贴壁生长
细胞形态:成纤维细胞
背景简介:MC3T3-E1subclone 14细胞株是从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。 从含抗坏血酸培养基:生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。 MC3T3亚克隆4和MC3T3亚克隆14在抗坏血酸和3到4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。 它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质(ECM)。MC3T3亚克隆24和MC3T3亚克隆30在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化。 不形成ECM, 可以作为亚克隆4和14的阴性对照。 矿化的亚克隆选择的表达作为成骨细胞标记的mRNA,及唾液酸糖蛋白(BSP),骨钙素(OCN),和甲状旁腺/甲状旁腺相关蛋白受体的mRNA。高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出相似数量的胶原质,表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfa1,一种成骨细胞相关转录因子。 植入缺陷小鼠以后,高分化性的亚克隆形成与骨类似的形成小骨的编织骨,低分化细胞只是产生纤维组织。 这些细胞系是研究体外成骨细胞分化的好模型,尤其是ECM信号。 它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类似。
生物等级:1
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:collagen
保藏机构:ATCC; CRL-2594
培养基:90% DMEM+10% FBS+双抗
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
公司正在出售的产品:
BOLA2蛋白抗体 BOLA2
G蛋白结合蛋白3抗体 Anti-SPG3A/Atlastin 凋亡相关蛋白1抗体 Anti-RYBP/APAP1
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大鼠抗血小板抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒 Rat platelet antibody IgG ELISA kit
小鼠RAR的相关孤独受体C(RORC)elisa分析检测试剂盒 RORCELISAkit
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MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14人白介素35(IL-35)elisa分析检测试剂盒 IL-35ELISAKit
PSP抗体 Persephin
培养注意事项 : 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。 4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议 1:2 传代 。 9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。