细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称 MDA-KB2人乳腺细胞 英文名称 MDA-KB2:MDAKB2 产品货号 A01X837 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%, 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 人 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 见说明 用途 仅供科研研究实验 商品详情:
产品名称
MDA-KB2人乳腺细胞
英文名称
MDA-KB2:MDAKB2
产品货号
A01X837
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%,
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
见说明
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气��:空气,100%, 温度:37℃
培养方案B(可选)
DMEM+10% FBS+1% P/S
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:5
推荐换液频率 2-3次/周
注意事项 1.该细胞推荐使用Leibovitz's L-15培养基进行培养,Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,会产生细胞毒性;2.如您没有无二氧化碳的培养箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培养基时即可正常通入5%二氧化碳;3.配套培养基默认Leibovitz's L-15配置,如需DMEM配方,请联系销售下单备注更改。
参考资料(来源文献)
年龄(性别) 女性;48岁
组织来源 乳腺
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 乳腺癌细胞
生物等级 BSL-1
倍增时间 32-40 hours
基因表达情况 luciferase; The cell line expresses firefly luciferase under control of the MMTV promoter that contains response elements for both glucocorticoid receptors (GR) and androgen receptors (AR)
保藏机构 ATCC; CRL-2713
人多巴胺D1受体(D1R)elisa分析检测试剂盒 HumanD1RELISAKit
活体细胞氧化应激活性氧(ROS)原位荧光染色试剂盒(羟自由基) 大鼠血管紧张素原(aGT)elisa检测试剂盒免费代测
猴25羟基维生素D3(25 HVD3)elisa分析检测试剂盒 25 HVD3 ELISA kit
MPV17L蛋白抗体 MPV17L
抑癌蛋白TCHP抗体 Anti-TCHP 分泌性蛋白RSPO1抗体 Anti-RSPO1
果菜柠檬酸比色法定量检测试剂盒 小鼠DAB2互作蛋白(DAB2IP)elisa分析检测试剂盒
神经生长因子调控抑制蛋白抗体 ELL3
轴索过度生长抑制因子-A抗体 Anti-Nogo-A 神经降压素受体3抗体(糖蛋白95) Anti-Sortilin/NTR3/Gp95ENTPD8蛋白抗体 ENTPD8
细胞分裂周期蛋白16抗体 APC6
APC标记的兔抗亲和素 Rabbit Anti-Avidin / APC
人β内啡肽受体(β-EPR)elisa分析检测试剂盒 β-EPRELISAKit
猪肠三叶因子(ITF)elisa分析检测试剂盒 ITFELISAKit
大鼠肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)elisa分析检测试剂盒 HBEGF ELISA kit
MDA-KB2人乳腺细胞豚鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)elisa分析检测试剂盒 GAPDHELISAkit
Hermansky-Pudlak综合征蛋白3抗体 HPS3
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。