细胞培养操作：
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
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产品名称
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MDA-MB-231+LUC人乳腺癌细胞荧光素酶标记
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英文名称
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MDA-MB-231+LUC:MDAMB231LUC
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产品货号
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A01X841
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培养条件
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气相：95%空气+5%二氧化碳；
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生长特性
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贴壁生长
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细胞形态
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上皮细胞样
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产品种属
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人
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冻存条件
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无血清冻存液，液氮储存
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组织来源
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情：
细胞别称：MDA-MB-231-LUC-PURO；人三阴性乳腺癌细胞-LUC-PURO；人三阴性乳腺癌细胞株-荧光素酶标记
种属来源：人
年龄性别：女
组织来源：
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
背景简介：MDA-MB-231是从一名51岁的白人女性乳腺癌患者的胸水中分离建立的，能稳定表达萤火虫荧光素酶。此细胞株性状稳定，培养时不需要添加维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。该细胞表达EGF受体、TGF-&alpha受体和WNT7B癌基因，通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。在裸鼠和ALS处理的BALB/c小鼠中，能形成低分化腺癌(Ⅲ级)。
生物等级：1
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
puro药筛浓度MDA-MB-231-LUC细胞puro药筛浓度为1.0ug/ml，培养过程中可不用再添加puro，如若担心抗性随着传代时间降低，可定期用0.5ug/ml浓度puro维持。加药需在细胞状态良好情况下。
保藏机构：ATCC; CRL-12532 ATCC; HTB-26
ATCC; CRM-HTB-26 BCRC; 60425 BCRJ; 0164 DSMZ; ACC-732 ECACC; 92020424
培养基：89% DMEM +10% FBS+1%PS
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
公司正在出售的产品：
血红蛋白ζ链/Hemoglobin ζ 抗体 HBZ
端粒结合蛋白2抗体 Anti-TRF2 蛋白激酶C beta 1/2抗体 Anti-PKC beta 1/2
核孔蛋白样蛋白2抗体 NUPL2
磷酸化活化复制因子2抗体 phospho-ATF2 (Ser480)
锌指蛋白BED5抗体 Anti-ZBED5 神经毒性因子ICP34.5（人单纯疱疹Ⅰ型）抗体 Anti-HSV 1
磷酸化酶激酶γ2 Anti-PHKG2 信号诱导增殖相关蛋白1样蛋白2抗体 Anti-SIPA1L2
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锌指蛋白754抗体 Anti-Rex1/Zinc finger protein 754 神经突触相关蛋白SLITRK6抗体 Anti-SLITRK6人胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa分析检测试剂盒 Casp-3ELISAKit
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大鼠Smad1 elisa分析检测试剂盒 Rat Mothers against
decapentaplegic homolog 1 ELISA Kit
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可染20～30张片
EB病毒DNA纯化试剂盒 小鼠谷光甘肽合成酶(GSS)elisa检测试剂盒
蛛受体3抗体 LPHN3
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猴B病毒(BV)elisa分析检测试剂盒 Monkey B virus
Infections ELISA Kit
细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。
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