细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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MDA-MB-415人乳腺癌细胞
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英文名称
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MDA-MB-415:MDAMB415
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产品货号
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A01X843
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培养条件
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气相:空气,100%
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样
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产品种属
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人
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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组织来源
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未知
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 Leibovitz's L-15+10μg/ml Insulin+10μg/ml Glutathione+15% FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,100%
温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:3
推荐换液频率 2~3次/周
注意事项 1、该细胞推荐使用Leibovitz's L-15培养基进行培养,Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,会产生细胞毒性; 2、如您没有无二氧化碳的培养箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培养基时即可正常通入5%二氧化碳; 3、配套培养基默认Leibovitz's
L-15配置,如需DMEM配方,请联系销售下单备注更改。
背景描述 MDA-MB-415细胞源于一名38岁患有乳腺腺癌女性的胸腔积液,MDA-MB-415细胞表达WNT7B癌基因。MDA-MB-415细胞形成平展延伸的上皮细胞样,在电镜下呈现结节,伴随着延伸的微管和微板。MDA-MB-415细胞不容易用yi酶消化。
年龄(性别) 女性,38岁
组织来源 未知
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 乳腺癌细胞
生物等级 1
致瘤性 No, in immunosuppressed
mice.Yes, in semisolid medium.
抗原表达情况 Blood Type O
基因表达情况 amelogenin (X
chromosome)(AMELEX)
保藏机构 ATCC; HTB-128
公司正在出售的产品:
Nonylphenol 9号染色体开放阅读框153抗体
羊白介素7(IL7)elisa生化检测试剂盒 IL7 ELISA kit
小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)elisa生化检测试剂盒 壬基酚抗体
寡核苷酸探针非同位素HRP化学发光法DNA南方杂交试剂盒 犬α-1/2干扰素(IFN-α1/2)elisa生化检测试剂盒
肿瘤坏死因子受体相关因子7抗体 Anti-TRAF7 磷酸化血小板源性生长因子受体α/β抗体 Anti-Phospho-PDGFRA(Tyr849)/PDGFRB(Tyr857)
人膀胱癌抗原(UBC)elisa生化检测试剂盒 UBCELISAKit
大鼠2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)elisa检测试剂盒 C9orf153
磷酸甘油酸脱氢酶抗体 Anti-PHGDH 双链RNA结合蛋白Staufen2抗体 Anti-STAU2信号传导T细胞活化相关蛋白抗体 SH2D1A
0.5摩尔 EDTA分子生物级溶液 小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)elisa生化检测试剂盒
PE标记的鼠抗人IgG H&L单克隆抗体 Mouse Anti-Human IgG H&L (3D3) mAb /
PE
人COP9 结构光形态发生同源物亚基2(拟南芥)(COPS2)elisa生化检测试剂盒 HumanCOPS2ELISAKit
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa生化检测试剂盒 FⅡELISAKit
大鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)elisa生化检测试剂盒 Aβ1-42 ELISA Kit
MDA-MB-415人乳腺癌细胞人核心蛋白聚糖(DCN)elisa生化检测试剂盒 DCNELISAKit
ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 植物核蛋白提取试剂盒100T
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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