细胞培养操作： 1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
产品名称 MKN-45人胃癌细胞 英文名称 MKN-45:MKN45 产品货号 A01X857 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 生长特性 半贴半悬 细胞形态 圆形 产品种属 人 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 说明书 用途 仅供科研研究实验 商品详情：
产品名称
MKN-45人胃癌细胞
英文名称
MKN-45:MKN45
产品货号
A01X857
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
半贴半悬
细胞形态
圆形
产品种属
人
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
说明书
用途
仅供科研研究实验
生长特性 半贴半悬
细胞形态 圆形
生长培养基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
温度：液氮
温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 MKN-45 细胞是由 Hojo H建立，源于日本一位62岁低分化胃腺癌女性患者的肝转移灶。
年龄（性别） 女；62岁
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 胃癌细胞
生物等级 1
倍增时间 ~30-60 hours
GTPBP2 动力蛋白轻链Tctex-3抗体
氧固醇结合蛋白样10抗体 OSBPL10
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SIK2抗体 Anti-SNF1LK2/SIK2 G蛋白结合蛋白2抗体
血栓调节蛋白抗体 Anti-Thrombomodulin/CD141 孕诱导阻断因子抗体 Anti-PIBF
锌指蛋白ZBTB8A抗体 Anti-ZBTB8A 核受体蛋白NR2E3抗体 Anti-NR2E3
钙结合蛋白样39抗体 CAB39L
蛋白激酶C亚型G抗体 Anti-PKC-γ/SCA14 DYNLT3
RNA结合蛋白20抗体 Anti-RBM20 AFG3样蛋白2/脊髓小脑共济失调蛋白28抗体 Anti-SCA28/AFG3L2人骨膜蛋白/成骨细胞特异性因子2(POSTN)elisa生化检测试剂盒 POSTNELISAkit
N-乙酰转移酶8B抗体 Anti-NAT8B 锌指蛋白340抗体 Anti-ZBTB46/ZNF340/BTBD4
大鼠P0蛋白(p0)elisa生化检测试剂盒 p0 ELISA Kit
半乳糖基转移酶（galactosyl transferase） 人α-烯醇化酶(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)elisa生化检测试剂盒
大鼠白介素23受体(IL23R)elisa检测试剂盒 小鼠透明质酸(HA)elisa检测试剂盒
脂肪分解刺激脂蛋白受体抗体 LSR/Lipolysis Stimulated Lipoprotein Receptor
MKN-45人胃癌细胞B细胞迁移基因4抗体 BTG4
L选择素抗体 Anti-L-Selectin/CD62L 环指蛋白133抗体 Anti-RNF133
细胞传代培养操作步骤： （1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。 （2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。 （3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 （4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。 （5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。 （6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。 （7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。 （8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 （9）细胞冻存。