细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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MOVAS小鼠主动脉血管平滑肌细胞
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英文名称
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MOVAS:MOVAS
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产品货号
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A01X1084
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培养条件
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生长特性
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贴壁生长
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细胞形态
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上皮细胞样,多角形
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产品种属
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小鼠
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冻存条件
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详见说明
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组织来源
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小鼠心脏主动脉;平滑肌
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
细胞介绍
1999年12月通过胶原酶-弹性蛋白酶消化分离的原代血管主动脉平滑肌细胞用编码SV40大T抗原以及新霉素抗性基因的逆转录病毒转导。在 0.4 mg/ml G418 存在下选择克隆并通过有限稀释进行亚克隆。来源ATCC
CRL-2797 可提供COA。
细胞特性
1)来源: C57BL/6小鼠心脏主动脉;平滑肌
2)形态:上皮细胞样,多角形,贴壁细胞
3)含量:>1x106细胞数
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5)用途:仅供科研使用。所有废液及接触过此细胞的器皿需要后方能丢弃。
2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造员伤害。
使用范围
本产品于科学研究,绝不可作为动物或人类的产品使用。
注意事项
1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要后方能丢弃。
公司正在出售的产品:
NORRIN 通用转录因子2H亚基4/TFIIH p52抗体
羊α晶体B链(CRYAB)elisa生化检测试剂盒 CRYAB ELISA kit
小鼠磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)elisa检测试剂盒 诺里病NDP蛋白/早产儿视网膜病蛋白抗体
人体P14基因甲基化检测试剂盒 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)elisa检测试剂盒
酪蛋白硫酸转移酶2抗体 Anti-TPST2 磷酸化磷酯酶Cβ3抗体 Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser1105)
人伴侣蛋白10(CPN10)elisa生化检测试剂盒 CPN10ELISAKit
大鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)elisa生化检测试剂盒 GTF2H4
蛋白磷酸酶2C亚型α抗体 Anti-PP2CA/PPM1A 单链DNA结合蛋白相互作用蛋白1 Anti-SOSSC/C9orf80FAM92A1蛋白抗体 FAM92A1
细胞RSK3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) 人基质金属蛋白酶-3(MMP-3)elisa检测试剂盒
APC标记的鼠抗人IgG H&L单克隆抗体 Mouse Anti-Human IgG H&L (3D3) mAb /
APC
人COLL2-1NO2 elisa生化检测试剂盒 HumanCOLL2-1NO2ELISAkit
小鼠凝血因子Ⅰ(FⅠ)elisa生化检测试剂盒 FⅠELISAKit
大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)elisa生化检测试剂盒 Aβ1-40 ELISA Kit
MOVAS小鼠主动脉血管平滑肌细胞人核糖体合成蛋白NSA2同源物(NSA2)elisa生化检测试剂盒 HumanNSA2ELISAKit
猪αN乙酰葡糖胺糖苷酶(NAGLU)elisa生化检测试剂盒 大鼠肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)elisa检测试剂盒
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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