细胞系实验步骤:
一、细胞培养准备: 生物柜的使用:确保所有接触细胞的物品都在生物柜中通过紫外,防止污染。 培养皿和培养瓶:提供细胞生长的环境,保持恒定的温度(通常为37℃)。 培养基和血清:特制的培养基包含各种营养物质,如糖、氨基酸和维生素,添加胎牛血清和双抗以提供生长因子和防止污染。 二、细胞培养过程: 细胞接收与记录:记录细胞系的相关信息,包括背景信息、传代培养、冷冻保存等。 细胞形态观察:定期检查细胞的形态和行为,确保细胞状态健康,无污染。 细胞传代:当细胞密度超过80%时进行传代,注意消化时间和条件,避免细胞损伤。 三、细胞系鉴定与维护: 细胞系鉴定:通过STR图谱确定细胞的遗传特征,防止细胞系被误认或交叉污染。 细胞保存与管理:定期进行细胞冷冻保存,确保细胞的长期存活和可用性。
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NCI-H1703人肺癌细胞
商品属性:
产品货号
A01X877
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
产品分类
人细胞系
产品种属
人
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
英文名称
NCI-H1703:NCIH1703
组织来源
肺
商品介绍:
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 NCI-H1703细胞是于1987年建系,源自一位54岁患有非小细胞肺癌的白人男性,该患者为吸烟者。
年龄(性别) 男性;54岁
组织来源 肺
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生物等级 BSL-1
保藏机构 ATCC; CRL-5889
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培养注意事项 : 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。 4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议 1:2 传代 。 9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。