细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称 NCI-H1963人小细胞肺癌细胞 英文名称 NCI-H1963 产品货号 AXB6508 培养条件 80% RPMI 1640 + 20% h.i. FBS37 ℃, 5% CO2 生长特性 悬浮生长 细胞形态 成团 产品种属 人 冻存条件 90% FBS + 10% DMSO 组织来源 肺 用途 仅供科研研究实验 商品详情:
产品名称
NCI-H1963人小细胞肺癌细胞
英文名称
NCI-H1963
产品货号
AXB6508
培养条件
80% RPMI 1640 + 20% h.i. FBS37 ℃, 5% CO2
生长特性
悬浮生长
细胞形态
成团
产品种属
人
冻存条件
90% FBS + 10% DMSO
组织来源
肺
用途
仅供科研研究实验
种属来源;人
组织来源;肺
性别年龄;56岁, 男性
生长特性;悬浮生长
细胞形态;成团
细胞规格;1 X 106cells/T25或1 mL冻存管
培养条件;80% RPMI 1640 + 20% h.i. FBS37 ℃, 5% CO2
冻存条件;90% FBS + 10% DMSO
传代方法;1:3传代, 2-3天传1代
PYCR2 癌胚抗原相关细胞粘附分子3抗体
IOC4 IOC4
载玻片细胞APC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 P5C还原酶2抗体
细胞色素P450亚酶CYP2C8(DBF)活性荧光定量检测试剂盒 小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)elisa生化检测试剂盒
泛素蛋白连接酶C抗体 Anti-UBE2C 原钙粘蛋白γA8抗体 Anti-PCDHGA8
凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗体 Apaf1 Interacting Protein
大鼠胃泌素(Gastrin)elisa检测试剂盒 CEAM3
猪圆环Ⅱ型衣壳蛋白 Anti-capsid protein 钠氢通道蛋白9家族A9抗体 Anti-SLC9A9ZCCHC8蛋白抗体 ZCCHC8
WB一抗稀释液 100ml 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa检测试剂盒
碱性磷酸酶(AP)标记的驴抗豚鼠IgG H&L Donkey Anti-Guinea Pig IgG H&L / AP
牛血清白蛋白(BSA)抗体(IgA)elisa生化检测试剂盒 Bovine serum albumin(BSA)antibody(IgA)ELISA Kit
小鼠谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)elisa生化检测试剂盒 GSH-PxELISAKit
仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) elisa生化检测试剂盒 MMP-9 ELISA Kit
NCI-H1963人小细胞肺癌细胞人丁酰胆碱酯酶(BCHE)elisa生化检测试剂盒 BCHEELISAkit
抗淬灭剂Ⅰ(活体染色持久发光) 绵羊甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)elisa生化检测试剂盒
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。