细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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NCI-H345人小细胞肺癌细胞
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英文名称
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NCI-H345
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产品货号
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AXB7151
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培养条件
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DMEM: F-12 Medium
+ 0.005mg/ml Insulin + 0.01 mg/ml Transferrin + 30 nM Sodium selenite +10 nM Hydrocortisone+10 nM
beta-estradiol+2 mM L-Glutamine Solution + 10% FBS37 ℃, 5% CO2
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生长特性
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混合状态,悬浮的多细胞聚集物和少部分贴壁生长
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细胞形态
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产品种属
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人
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冻存条件
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90% FBS + 10% DMSO
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组织来源
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人
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
种属来源;人
组织来源;人
性别年龄;男性,40岁
生长特性;混合状态,悬浮的多细胞聚集物和少部分贴壁生长
细胞形态;
细胞规格;1 X 106cells/T25或1 mL冻存管
培养条件;DMEM: F-12 Medium + 0.005mg/ml
Insulin + 0.01 mg/ml Transferrin + 30 nM Sodium selenite +10 nM Hydrocortisone+10 nM beta-estradiol+2
mM L-Glutamine Solution + 10% FBS37 ℃, 5% CO2
冻存条件;90% FBS + 10% DMSO
传代方法;1:3传代,
2-3天传1代
公司正在出售的产品:
PCDHA2 缺氧诱导基因1蛋白/HIGD1A抗体
卟胆原脱氨酶抗体 HMBS
蔗糖合成酶SS测试盒 48T 紫外比色法 原钙粘附蛋白α2抗体
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磷酸化非受体型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗体 Anti-Phospho-TNK1
(Tyr277) 磷酸化星形胶质细胞PEA15抗体 Anti-Phospho-PEA15(Ser116)
血管**素相关蛋白5抗体 ANGPTL5
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磷酸肌醇磷脂酶PLCZ1抗体 Anti-PLCZ1 突触结合蛋白11抗体 Anti-Synaptotagmin XI前列腺素E受体4相关蛋白抗体 FEM1A
牛乳铁蛋白(LTF)elisa检测试剂盒 体液单胺氧化酶B型(MAO-B)活性化学发光法定量检测试剂盒
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人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa生化检测试剂盒 5-HIAAELISAKit
小鼠抗心肌抗体(AMA)elisa生化检测试剂盒 AMAELISAKit
大鼠CD68分子(CD68)elisa生化检测试剂盒 CD68 ELISA kit
NCI-H345人小细胞肺癌细胞人高密度脂蛋白1(HDL1)elisa生化检测试剂盒 HDL1ELISAKit
大鼠Toll样受体9(TLR9)elisa检测试剂盒 小鼠聚集蛋白聚糖(AGC)elisa检测试剂盒
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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