细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称 NCI-H460人非小细胞肺癌细胞 英文名称 NCI-H460 产品货号 AXB6538 培养条件 RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2 生长特性 贴壁生长 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 人 冻存条件 90% FBS + 10% DMSO 组织来源 肺 用途 仅供科研研究实验 商品详情:
产品名称
NCI-H460人非小细胞肺癌细胞
英文名称
NCI-H460
产品货号
AXB6538
培养条件
RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2
生长特性
贴壁生长
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
90% FBS + 10% DMSO
组织来源
肺
用途
仅供科研研究实验
种属来源;人
组织来源;肺
性别年龄;男性
生长特性;贴壁生长
细胞形态;上皮细胞样
细胞规格;1 X 106cells/T25或1 mL冻存管
培养条件;RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2
冻存条件;90% FBS + 10% DMSO
传代方法;1:3传代, 2-3天传1代
RCAD 卵母细胞特异性KHDC1抗体
甲状腺受体相互作用蛋白8抗体 JMJD1C
细胞半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 RCAD蛋白抗体
大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa生化检测试剂盒 小鼠细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)elisa检测试剂盒
磷酸化自噬相关蛋白1抗体 Anti-Phospho-ATG1(Ser556) 原钙粘蛋白γ10抗体 Anti-PCDHGA10
第七号染色体开放阅读框12抗体 CASD1/C7orf12
人癌症促凝素(CP)elisa检测试剂盒 KHDC1
原钙粘蛋白15抗体 Anti-PCDHB15/PCDHB22 泛素特异性蛋白酶28抗体 Anti-USP28G2E3蛋白抗体 G2E3
大鼠前心钠肽(Pro-ANP)elisa检测试剂盒 银染法细胞端粒酶活性TRAP电泳分析试剂盒
PE标记的羊抗小鼠IgG H&L Goat Anti-Mouse IgG H&L / PE
牛生长(GH)elisa生化检测试剂盒 GH ELISA Kit
小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)elisa生化检测试剂盒 PARCELISAKit
胰岛素样生长因子1(IGF-1)elisa生化检测试剂盒 IGF-1 ELISA Kit
NCI-H460人非小细胞肺癌细胞人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)elisa生化检测试剂盒 PLPELISAKit
血液甘露醇含量比色法定量检测试剂盒 豚鼠白三烯D4(LTD4)elisa检测试剂盒
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。