细胞培养操作： 1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
产品名称 NCI-H522 人非小细胞肺癌腺癌细胞 英文名称 NCI-H522:NCIH522 产品货号 A01X893 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%, 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 人 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 肺 用途 仅供科研研究实验 商品详情：
产品名称
NCI-H522 人非小细胞肺癌腺癌细胞
英文名称
NCI-H522:NCIH522
产品货号
A01X893
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%,
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
肺
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
温度：液氮
培养方案A（默认）
生长培养基:
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培养条件:
气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:6
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 NCI-H522 [H522] is a cell line exhibiting epithelial morphology that were isolated from the lungs of a 58-year-old White male with adenocarcinoma.
年龄（性别） 男性；58岁
组织来源 肺
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生物等级 BSL-1
倍增时间 38.2 hours (NCI-DTP=NCI-H522)
保藏机构 ATCC; CRL-5810
SGEF 脂质磷酸磷酸酶相关蛋白3抗体
LARP2蛋白抗体 LARP2
锌指蛋白471抗体 Anti-ZNF471 SGEF蛋白抗体
溴化丙胺太林相关蛋白2抗体 Anti-STOML2/SLP2 mTOR相关调控蛋白抗体 Anti-Raptor
5-羟色胺受体2C抗体 Anti-5HTR2C 腺苷酸硫酸激酶1抗体 Anti-PAPSS1
信号转导蛋白亚基6抗体 COPS6
嗜中性粒细胞胞浆因子1抗体 Anti-NCF1/p47 phox LPPR3
多腺苷二磷酸多聚酶4抗体/多聚ADP-核糖聚合酶4 Anti-PARP4 磷酸化转录因子3抗体 Anti-phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355)麦角蛋白抗体 Gliadin
组织三磷酸肌醇（IP3）含量化学荧光定量检测试剂盒 山羊白介素10(IL-10)elisa检测试剂盒
羊抗鸡IgG H&L抗血清 Goat Anti-Chicken IgG H&L whole serum
鸡白介素3(IL-3)elisa生化检测试剂盒 IL-3 ELISA Kit
小鼠白蛋白elisa生化检测试剂盒 MousealbuminELISAKit
鱼雌二醇(E2)elisa生化检测试剂盒 E2ELISA kit
NCI-H522 人非小细胞肺癌腺癌细胞人丙烯醛(ACR)elisa生化检测试剂盒 ACRELISAkit
小鼠新生甲状腺素(NN-T4)elisa检测试剂盒 大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)elisa检测试剂盒
细胞传代培养操作步骤： （1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。 （2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。 （3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 （4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。 （5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。 （6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。 （7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。 （8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 （9）细胞冻存。