细胞培养操作： 1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
产品名称 NIH/3T3小鼠胚胎细胞 英文名称 NIH/3T3:NIH3T3 产品货号 A01X1090 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 成纤维细胞样 产品种属 小鼠 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 胚胎 用途 仅供科研研究实验 商品详情：
产品名称
NIH/3T3小鼠胚胎细胞
英文名称
NIH/3T3:NIH3T3
产品货号
A01X1090
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
成纤维细胞样
产品种属
小鼠
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
胚胎
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 成纤维细胞样
生长培养基 DMEM＋10% CS＋1% P/S
温度：液氮
温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 NIH/3T3细胞是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触性抑制的连续传代细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株，建立的NIH/3T3细胞株又进行了5轮以上亚克隆。NIH/3T3细胞对肉瘤病毒的转化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，对DNA转化及转染研究十分有用；NIH/3T3细胞鼠痘病毒阴性。
年龄（性别） 胚胎
组织来源 胚胎
细胞类型 自发永生化细胞
生物等级 1
倍增时间 ~20小时
保藏机构 ATCC; CRL-1658 ATCC; CRL-6442DSMZ; ACC-59 ECACC; 93061524
Protein Z 后期促进复合蛋白3抗体
A型流感聚合酶碱性蛋白2抗体 Influenza A Polymerase basic protein 2
小鼠溶酶体酸性磷酸酶2(ACP2)elisa检测试剂盒 蛋白Z抗体
抗原涂板（COATING）缓冲液 人G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)elisa检测试剂盒免费代测
UBX结构域域蛋白D2抗体 Anti-UBXD2 神经特异蛋白酪氨酸磷酸酶N5抗体 Anti-PTPN5/STEP
锚蛋白重复结构域38抗体 ANKRD38
大鼠TAR DNA结合蛋白43(TARDBP)elisa检测试剂盒 CDC27
细胞色素氧化酶装配因子PET112抗体 Anti-PET112L SNAPC3蛋白抗体 Anti-SNAPC3锌指蛋白BED抗体 ZBED2
环境镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒 山羊白介素6(IL-6)elisa检测试剂盒
辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgM Goat Anti-Human IgM / HRP
犬B细胞瘤因子2(Bcl-2)elisa生化检测试剂盒 Bcl-2 ELISA Kit
小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体β(PPAR-β)elisa生化检测试剂盒 PPAR-βELISAKit
猴白介素6(IL-6)elisa生化检测试剂盒 IL-6 ELISA Kit
NIH/3T3小鼠胚胎细胞人儿茶酚胺(CA)elisa生化检测试剂盒 CAELISAKit
鱼生长(GH)elisa生化检测试剂盒 大鼠抗缪勒管(AMH)elisa检测试剂盒
细胞传代培养操作步骤： （1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。 （2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。 （3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 （4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。 （5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。 （6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。 （7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。 （8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 （9）细胞冻存。