细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
NIT-1小鼠胰岛素瘤β细胞
英文名称
NIT-1
产品货号
AXB7137
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
小鼠
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
胰腺/朗格汉斯胰岛
用途
仅供科研研究实验
商品详情: 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 生长培养基 Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ 推荐传代比例 1:2-1:3 推荐换液频率 2~3次/周 年龄(性别) 10周龄 组织来源 胰腺/朗格汉斯胰岛 细胞类型 肿瘤细胞 肿瘤类型 胰腺癌细胞 生物等级 2 保藏机构 ATCC; CRL-2055
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S
温度:液氮
温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:3
推荐换液频率 2~3次/周
年龄(性别) 10周龄
组织来源 胰腺/朗格汉斯胰岛
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 胰腺癌细胞
生物等级 2
保藏机构 ATCC; CRL-2055
R Cadherin 转录调节因子C/EBPδ抗体
Ran结合蛋白11抗体 IPO11
载玻片细胞BAD蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 R Cadherin/CDH4
细胞乙醇比色法定量检测试剂盒 小鼠D-多巴色素变位酶(DDT)elisa检测试剂盒
泛素蛋白连接酶U抗体 Anti-UBE2U 组蛋白精氨酸甲基转移酶5抗体 Anti-PRMT5
β淀粉样前体蛋白结合蛋白2抗体 APBA2
大鼠血管内皮生长因子B(VEGFB)elisa检测试剂盒 CEBP Delta
磷酸化磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗体 Anti-phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070) 固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白抗体 Anti-SCAP/SREBF chaperone proteinZCWPW2蛋白抗体 ZCWPW2
超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒 小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)elisa检测试剂盒
Cy5.5标记的驴抗人IgG H&L Donkey Anti-Human IgG H&L / Cy5.5
牛血清白蛋白(ALB)elisa生化检测试剂盒 ALB ELISA kit
小鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)elisa生化检测试剂盒 GAD-Ab-IgGELISAKit
仓鼠核因子κB(NF-κB)elisa生化检测试剂盒 NF-κB Elisa Kit
NIT-1小鼠胰岛素瘤β细胞人调宁蛋白-1(CNN1)elisa生化检测试剂盒 CNN1ELISAKit
细胞总乳酸比色法定量检测试剂盒 蔗糖酶测试盒
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。