NP-69

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

细胞别称；NP69；人鼻咽上皮细胞

种属来源；人

组织来源；鼻

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

细胞代数；10代以内

细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测；无

���养基；1）准备 角质细胞无血清培养基 (包含两个组份：基础培养基1瓶+生长因子1管：1mL或者5mL两种）添加对应因子按照收到的生长因子对应规格：1mL加0.2%, 5mL 加1%，同时添加2%FBS ; 1% P/S 来培养细胞。或者 准备Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)同时添加2% FBS ; 1% P/S  来培养细胞。备注: 1、Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)培养液包含两个组份：基础培养基1瓶500mL+生长因子1管1mL. 2、由于角质细胞无血清培养基或者Defined K-SFM为无血清培养液无法终止胰酶消化，所以消化完成后要通过离心（建议125xg离心5到10分钟）去除胰酶或者用带10%血清的培养基来终止消化，再进行后续操作。

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

SCAND3       环磷酸鸟苷门控通道蛋白CNG4抗体

脑蛋白9抗体       KNDC1

着丝粒ZWILCH蛋白抗体  Anti-ZWILCH       SCAND3蛋白抗体

转录因子SOX17抗体  Anti-SOX17       衰老标记蛋白30抗体  Anti-Regucalcin/SMP30

丝氨酸/苏氨酸激酶36融合同源蛋白抗体  Anti-STK36       非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗体  Anti-PAR3

B细胞转录激活因子抗体       BATF

NADPH氧化酶NOX家族的成员4抗体  Anti-NOX4/NADPH oxidase 4      CNGB1

前列腺特异性G蛋白偶联受体/嗅觉受体51E2抗体  Anti-PSGR/OR52A2       踝蛋白抗体  Anti-Talin锌指蛋白677抗体       ZNF677

载玻片细胞CASPASE-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒       磷脂酶C（PLC）测试盒

兔抗人IgG抗血清       Rabbit Anti-Human IgG H&L whole serum

鸡凋亡相关因子(FAS)elisa生化检测试剂盒       FAS ELISA Kit

小鼠白介素2受体β(IL2rb/CD122)elisa生化检测试剂盒       Il2rb/CD122ELISAKit

鱼卵黄高磷蛋白(PV)elisa生化检测试剂盒       PV ELISA Kit

NP-69人补体因子H(CFH)elisa生化检测试剂盒       HumanCFHELISAKit

小鼠G蛋白偶联受体120(GPR120)elisa检测试剂盒       可溶性淀粉合成酶(SSS）测试盒

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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