OP9小鼠骨髓基质细胞

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 成纤维细胞样

生长培养基 MEMα＋20% FBS＋1% P/S

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

背景描述 OP9细胞源自新生的op/op小鼠颅盖。因编码M-CSF的基因中的一个突变，OP9细胞不能**有功能的巨噬细胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在对胚胎干细胞(ES)分化成血细胞而不是其他巨噬细胞有抑制功能。OP9细胞可以用于与小鼠胚胎干细胞共培养以诱导胚胎干细胞分化成成红血球来源的、骨髓来源的和B细胞谱系的血细胞。与OP9细胞共培养不需要外源的生长因子或复杂的胚胎结构，这个系统对研究造血细胞的发育和分化的分子机理有用。

年龄（性别） 胚胎

组织来源 骨髓，基质

细胞类型 基质细胞系

生物等级 1

倍增时间 ~26小时

保藏机构 ATCC; CRL-2749

PRPF38A       细胞纤毛内转运同源蛋白80抗体

A型流感病毒蛋白PA-X抗体       Influenza A Protein PA-X

小鼠肾上腺髓质素(ADM)elisa检测试剂盒       mRNA前体剪接因子Prp38抗体

通用型肌酐（CREATININE）化学比色法定量检测试剂盒       人P0蛋白抗体(IgM)elisa检测试剂盒

泛素硫酯酶L3抗体  Anti-UCHL3       磷酸蛋白聚糖PTPRZ抗体  Anti-PTP zeta/Phosphacan

2号染色体开放阅读框62抗体       C2orf62

大鼠β半乳糖苷酶(βGAL)elisa检测试剂盒      IFT80

磷酸化蛋白激酶C抗体 PKC ε  Anti-phospho-PKC Epsilon（Ser729）       S100钙结合蛋白P抗体  Anti-S100PFRMD6蛋白抗体       FRMD6

细胞中链羟脂酰脱氢酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量检测试剂盒       生物素检测试剂盒

辣根过氧化物酶标记的羊抗牛IgG H&L       Goat Anti-Bovine IgG H&L / HRP

犬B-细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa生化检测试剂盒       BLC-1/CXCL13 ELISA Kit

小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)elisa生化检测试剂盒       PPAR-αELISAKit

猴白介素2(IL-2)elisa生化检测试剂盒       IL-2 ELISA Kit

OP9小鼠骨髓基质细胞人鹅膏蕈碱elisa生化检测试剂盒       HumanAmanitinELISAKit

细胞膜/胞浆/核膜蛋白分步提取试剂盒50T       大鼠细胞功能关联抗原1α(LFA1α)elisa检测试剂盒

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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