PBMC人外周血单个核细胞

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

种属来源；人

组织来源；外周血

生长特性；细胞是混合体系，少量贴壁生长，大部分悬浮生长

形态特征；上皮细胞样

细胞详述；PBMC(peripheral blood mononuclear cell)，外周血单个核细胞，顾名思义，其主要细胞类型为血液里边具有单���核的细胞，主要包括细胞(T cellB cell)，单核细胞，巨噬细胞，树突状细胞和其他少量细胞类型。其中细胞占很大一部分。体外检测细胞首先要分离外周血单个核细胞。

产品规格；5x105cells/T25或1mL冻存管

培养基；pbmc人原代外周血单个核细胞培养基

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

换液频率；每2-3天换液一次

消化液；0.25%胰蛋白酶

Noxa       9号染色体开放阅读框171抗体

鸭生长1(GH1)elisa生化检测试剂盒       GH1 ELISA kit

小鼠肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)elisa生化检测试剂盒       Noxa蛋白抗体

血液D－乳酸比色法定量检测试剂盒       人Podocin elisa检测试剂盒

肿瘤蛋白D53抗体  Anti-TPD52L1/D53       多囊肾蛋白2抗体  Anti-Polycystin 2

人百日咳病毒抗体(IgM)elisa生化检测试剂盒       HumanbordetellapertussisantibodyIgMELISAkit

大鼠β2整合素(ITG β2/CD11+CD18)elisa检测试剂盒      C9orf171

磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体  Anti-phospho-PRKAA2(Ser173)       抗药蛋白抗体  Anti-SR1/Sorcin志贺氏菌菌体蛋白抗体       Shigella tropina

组织SYK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）       人抗精子抗体（AsAb）elisa检测试剂盒

Cy7标记的鼠抗人IgG H&L单克隆抗体       Mouse Anti-Human IgG H&L (3D3) mAb / Cy7

人CDCP1(CDCP1)elisa生化检测试剂盒       HumanCDCP1ELISAkit

小鼠尿微量白蛋白(ALB)elisa生化检测试剂盒       MAU/ALBELISAkit

大鼠β1整合素(ITG β1)elisa生化检测试剂盒       ITG β1 ELISA Kit

PBMC人外周血单个核细胞人核糖核酸酶(RNASE1/RIB1/RNS1)elisa生化检测试剂盒       RNASE1/RIB1/RNS1ELISAkit

小鼠肿瘤坏死因子配体超家族成员13(TNFSF13)elisa检测试剂盒       大鼠激肽原(KNG)elisa生化检测试剂盒

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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