细胞系实验步骤:
一、细胞培养准备:
生物柜的使用:确保所有接触细胞的物品都在生物柜中通过紫外,防止污染。
培养皿和培养瓶:提供细胞生长的环境,保持恒定的温度(通常为37℃)。
培养基和血清:特制的培养基包含各种营养物质,如糖、氨基酸和维生素,添加胎牛血清和双抗以提供生长因子和防止污染。
二、细胞培养过程:
细胞接收与记录:记录细胞系的相关信息,包括背景信息、传代培养、冷冻保存等。
细胞形态观察:定期检查细胞的形态和行为,确保细胞状态健康,无污染。
细胞传代:当细胞密度超过80%时进行传代,注意消化时间和条件,避免细胞损伤。
三、细胞系鉴定与维护:
细胞系鉴定:通过STR图谱确定细胞的遗传特征,防止细胞系被误认或交叉污染。
细胞保存与管理:定期进行细胞冷冻保存,确保细胞的长期存活和可用性。
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RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
商品属性:
产品货号
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A01X1100
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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产品分类
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小鼠细胞系
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产品种属
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小鼠
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生长特性
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贴壁细胞,不用胰酶消化
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细胞形态
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不规则形
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英文名称
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RAW 264.7:RAW 2647
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组织来源
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Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;单核细胞;巨噬细胞
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商品介绍:
生长特性 贴壁细胞,不用yi酶消化
细胞形态 不规则形
生长培养基 DMEM+10%
FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传��比例 1:6~1:8
推荐换液频率 2~3次/周
注意事项 1、该细胞不建议使用yi酶消化,yi酶会刺激分化; 2、
超过3天不传代细胞容易分化; 3、 培养时,存在少量分化细胞,属于正常现象。
背景描述 RAW 264.7细胞源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。RAW
264.7细胞不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。RAW
264.7细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖,并且可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导RAW 264.7细胞分解红血球,但对肿瘤靶细胞无作用。
年龄(性别) 雄性,成年
组织来源 Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;单核细胞;巨噬细胞
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 白血病细胞
生物等级 2
倍增时间 ~12-30小时
受体表达情况 complement (C3)
抗原表达情况 H-2d
基因表达情况 lysozyme, H-2d; Tested and
found negative for ectromelia virus (mousepox).
保藏机构 ATCC; TIB-71 ECACC; 91062702
公司正在出售的产品:
MSY2 下颌发育综合征相关蛋白FAKD3抗体
仓鼠白介素2(IL-2)elisa生化检测试剂盒 IL-2 ELISA Kit
小鼠生长分化因子11(GDF11)elisa检测试剂盒 DNA结合蛋白C抗体
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Anti-Chicken IgM / Cy5
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猪α干扰素(IFN-α)elisa生化检测试剂盒 大鼠激肽释放酶6(KLK6)elisa检测试剂盒
培养注意事项 :
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
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