RWPE-1人前列腺正常细胞

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

细胞别称：RWPE-1；人正常前列腺上皮细胞

种属来源：人

年龄性别：男；54岁

组织来源：前列腺正常细胞

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景简介：RWPE-1细胞来源于54岁白人男性。源于正常前列腺周边组织的上皮细胞经过转染HPV-18后建系得到该细胞株。在三维基质胶培养时，在雄作用下，RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基：中分泌PSA（kallikrein 3, KLK3）。来源于RWPE-1的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2细胞株和 RWPE2-W99细胞株。同时，用N-甲醇-N-硝基脲处理RWPE-1，建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株， 分别是 WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11 和 WPE1-NB26 细胞株。 据提供者报道，RWPE-1 细胞株经过检测，乙肝、丙肝、人缺陷病毒都呈阴性。

生物等级：2

细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测：无

基因表达情况：cytokeratin 18, cytokeratin 8; Tumor Supressor Gene(s): p53+, pRB+

保藏机构：ATCC; CRL-11609

培养基：K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ PS

培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

倍增时间：~22 hours

6-苄氨基腺嘌呤（6BA）含量试剂盒       人丁型肝炎IgM(HDV IgM)elisa分析检测试剂盒

体液HCV（HEPATITIS VIRUS C）病毒定性检测试剂盒       大鼠血管细胞粘附分子1(VCAM1)elisa检测试剂盒

大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa检测试剂盒免费代测       大鼠甲状腺素(T4)elisa检测试剂盒

糖果D-葡萄糖氧化法定量检测试剂盒       磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗体 PCK1

FAM91A1蛋白抗体 FAM91A1       锌指转录因子Slug抗体 SNAI2

猪结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)elisa检测试剂盒       人膀胱肿瘤抗原(BTA)elisa检测试剂盒

氯化钙通道活性的4抗体 calcium-activated chloride channel CLCA4      EXOSC4蛋白抗体 EXOSC4

嗅觉受体5F1抗体 OR5F1       大肠杆菌外膜孔道蛋白C抗体 OMPC酸性神经鞘磷脂酶抗体 Acid sphingomyelinase       PE标记人CD48单克隆抗体 human CD48/PE

1号染色体开放阅读框159抗体       C1orf159

蛋白激酶锚定蛋白13单克隆抗体 AKAP13       丝氨酸蛋白酶1抗体 PRSS1

PSD95结合蛋白2抗体 DLGAP2       19号染色体开放阅读框2抗体 URI1

20号染色体开放阅读框201抗体 C20orf201       黄体释放类似物抗体 GNRH/LHRH

鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体 IBDV       组织SPHK2激酶活性荧光定量检测试剂盒

RWPE-1人前列腺正常细胞人H-钙粘着蛋白/H-钙粘连蛋白(H-Cad/CDH13)elisa检测试剂盒       大鼠Toll样受体7(TLR-7)elisa检测试剂盒

METRNL蛋白抗体       METRNL

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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