SK-NEP-1人肾母细胞瘤细胞

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

生长特性 悬浮细胞

细胞形态 圆形

生长培养基 McCoy’s 5A＋15% FBS＋1% P/S

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

推荐传代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推荐换液频率 2~3次/周

注意事项 该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液；请勿直接倒掉细胞培养液。

背景描述 SK-NEP-1细胞的超微结构有少许微绒毛、连接复合物、形态完整的高尔基体、内质网多为光滑型、脂滴；没有病毒棵粒。

年龄（性别） 女；25岁

组织来源 肾，肋膜渗出液

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 肾癌细胞

生物等级 1

致瘤性 Yes, in nude mice; forms tumor with small cells consistent with Wilms' tumor.

抗原表达情况 Blood Type A; Rh+

保藏机构 ATCC; HTB-48

C1Q and collagen domain containing(ADIPOQ)ELISA kit       人对称二甲基精氨酸(SMDA)elisa分析检测试剂盒

HumanSymmetricdimethylarginine(SMDA)检测试剂盒       血液甘露醇含量比色法定量检测试剂盒

MouseC-terminalpeptideofbone-specificalkalinephosphatase检测试剂盒       仓鼠脂联素,含C1Q和胶原域(ADIPOQ)elisa分析检测试剂盒

银染法细胞端粒酶活性TRAP电泳分析试剂盒       胰岛素样肽5 a链抗体

C5orf54       细胞SPRK1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

豚鼠白三烯D4(LTD4)elisa检测试剂盒       大鼠前心钠肽(Pro-ANP)elisa检测试剂盒

INSL5 A chain      5号染色体开放阅读框54抗体

人基质金属蛋白酶4(MMP-4)elisa分析检测试剂盒       大鼠肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)elisa检测试剂盒PSMD11       生长抑制蛋白3抗体

5-羟色胺受体1E抗体       5HT1E Receptor

猪β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)elisa分析检测试剂盒       26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11抗体

ING3       泛素蛋白连接酶W抗体  Anti-UBE2W

含脯氨酸突触相关蛋白相互作用蛋白1抗体  Anti-ProSAPiP1       蛋白酪氨酸磷酸酶PTPσ抗体  Anti-PTPRS

神经迁移蛋白Slit2/3抗体  Anti-SLIT2/Slil3       Cy3标记的驴抗人IgG H&L

SK-NEP-1人肾母细胞瘤细胞Donkey Anti-Human IgG H&L / Cy3       肿瘤/睾丸抗原38抗体

组蛋白H2A/S抗体       HIST1H2AH

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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