人非小细胞肺癌细胞;NCI-H239

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

细胞别称；NCI-H239；人非小细胞肺癌细胞

种属来源；人

组织来源；肺癌；非小细胞肺癌

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

细胞代数；10代以内

背景简介；NCI-H239细胞源于一位51岁患有非小细胞肺癌黑人男性患者的前的肿瘤组织，表达C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；该细胞携带K-ras 12突变；p53基因246位密码子突变ATC→ATG；表达PDGF A和B链的异源mRNA；表达TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白 5、8和18阳性，波形蛋白阳性，神经丝蛋白阴性，多巴脱氢酶阴性；据报道，在软琼脂中该细胞形成克隆的效率为9.7%。

细胞规格；1x106cells/T25或1mL冻存管

支原体检测；无

培养基；RPMI-1640+10%FBS+1%双抗

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

KLHL26       细胞因子诱导蛋白29kDa抗体

CIP29       小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa检测试剂盒

仓鼠低密度脂蛋白(VLDL)elisa分析检测试剂盒       Kelch样蛋白26抗体

人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa分析检测试剂盒       NDUFB6蛋白抗体

GAPT       跨膜转运蛋白21抗体  Anti-TMP21

大鼠白介素1受体Ⅰ(IL1R1)elisa检测试剂盒       血清/血浆游离脂肪酸酶连续循环比色法定量检测试剂盒

NDUFB6      生长因子受体结合适应蛋白抗体

锌指蛋白RIZ1抗体  Anti-PRDM2       骨诱导因子抗体  Anti-OIFphospho-RAD9 (Ser272)       NSUN4蛋白抗体

人白介素28B(IL-28B)elisa生化检测试剂盒       IL-28BELISAkit

14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亚型抗体  Anti-14-3-3 (Alpha, Beta, Gamma, Delta, Epsilon)       磷酸化细胞周期检查控制蛋白质抗体

NSUN4       波形蛋白抗体  Anti-Vimentin

神经束蛋白186抗体  Anti-Nfasc186       环指蛋白157抗体  Anti-RNF157

兔抗甲状腺球蛋白  Anti-TG       大鼠表皮生长因子(EGF)elisa分析检测试剂盒

人非小细胞肺癌细胞;NCI-H239EGF ELISA Kit       人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)elisa分析检测试剂盒

乙型流感HA elisa生化检测试剂盒       Influenza B HA ELISA Kit

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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