细胞系实验步骤:
一、细胞培养准备: 生物柜的使用:确保所有接触细胞的物品都在生物柜中通过紫外,防止污染。 培养皿和培养瓶:提供细胞生长的环境,保持恒定的温度(通常为37℃)。 培养基和血清:特制的培养基包含各种营养物质,如糖、氨基酸和维生素,添加胎牛血清和双抗以提供生长因子和防止污染。 二、细胞培养过程: 细胞接收与记录:记录细胞系的相关信息,包括背景信息、传代培养、冷冻保存等。 细胞形态观察:定期检查细胞的形态和行为,确保细胞状态健康,无污染。 细胞传代:当细胞密度超过80%时进行传代,注意消化时间和条件,避免细胞损伤。 三、细胞系鉴定与维护: 细胞系鉴定:通过STR图谱确定细胞的遗传特征,防止细胞系被误认或交叉污染。 细胞保存与管理:定期进行细胞冷冻保存,确保细胞的长期存活和可用性。
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商品属性:
产品货号
AXB10716
冻存条件
无血清冻存液,液氮储存
产品分类
人细胞系
产品种属
人
生长特性
贴壁生长
细胞形态
上皮细胞样
英文名称
Calu-1-LUC-EGFP
组织来源
器官:肺;肿瘤分期:Ⅲ期; :表皮瘤;取材转移灶:肋膜
商品介绍:
细胞别称;Calu-1-LUC-EGFP;人肺癌细胞-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记;Calu-1-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记
种属来源;人
年龄性别;男;47岁
组织来源;器官:肺;肿瘤分期:Ⅲ期; :表皮瘤;取材转移灶:肋膜
生长特性;贴壁生长
细胞形态;上皮细胞样
细胞代数;10代以内
生物等级;1
细胞规格;1x106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测;无
培养基;89%McCoy's 5A+10% FBS+1%PS+1. 0ug/ml puro
培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件;无血清冻存液,液氮储存
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培养注意事项 : 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。 4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议 1:2 传代 。 9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。