人骨肉瘤细胞+LUC;U20S-LUC-PURO

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

细胞别称；U2OS-LUC-PURO；人骨肉瘤细胞株-荧光素酶标记；人骨肉瘤细胞株-LUC-PURO

种属来源；人

组织来源；骨

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

背景简介；Luciferase U-2 OS细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定，培养时不需要添加维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照，也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。U-2OS细胞(原名2T)是由Ponten·J和Saksela·E在1964年从一名15岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤中分离建立的。U-2 OS细胞与WI-38细胞共培养或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的补体结合试验(CF法)未检测到病毒。U-2 OS细胞表达胰岛素样生长因子I、II(IGF-I、IGF-II)受体和骨肉瘤衍生生长因子(ODGF)。

生物等级；1

细胞规格；1x106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测；无

保藏机构；ATCC; HTB-96 DSMZ; ACC-785 ECACC; 92022711

培养基；McCoy's 5A＋10% FBS＋1% PS+1. 0ug/ml puro

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

MFRP       双PHD-D4锌指蛋白2抗体

DPF2       小鼠Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)elisa检测试剂盒

大鼠糜蛋白酶(Chymotrypsin)elisa检测试剂盒       膜型卷曲相关蛋白MFRP抗体

中性木聚糖酶测定试剂盒       磷酸化异染色质蛋白1抗体（果蝇）

HSFY1       Toll样受体6抗体  Anti-TLR6/CD286

氨基卞三磺酸（ANTS）荧光辅助糖蛋白电泳（FACE）       冰冻切片组织CDK6蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr24)      热休克转录因子HSFY1抗体

G蛋白偶联嘌呤受体p2y10抗体  Anti-P2Y10       含patatin样磷脂酶6抗体  Anti-PNPLA6/NTERabbit Anti-Avidin / RBITC       磷酸化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1

人臂板蛋白3F(S3F)elisa生化检测试剂盒       HumanS3FELISAKit

转录调控激活蛋白SNF5抗体  Anti-SNF5       罗丹明标记的兔抗亲和素

phospho-GIT1 (Tyr545)       zeta相关蛋白70抗体  Anti-ZAP70

NUP54抗体  Anti-NUP54       轴突导向受体抗体  Anti-Robo

生长抑素抗体  Anti-Somatostatin       大鼠17羟孕酮(17-OHP)elisa分析检测试剂盒

人骨肉瘤细胞+LUC;U20S-LUC-PURO17-OHP ELISA Kit       人辅酶Q10(CoQ10)elisa分析检测试剂盒

鱼17α,20β羟基孕酮(17α,20βOH-PROG)elisa生化检测试剂盒       20βOH-PROG)ELISA kit

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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