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产品资料

人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记;293T-GFP

人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记;293T-GFP
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  • 产品名称:人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记;293T-GFP
  • 产品型号:AXB10713
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记;293T-GFP公司正在出售的产品:Calu-3人肺腺癌细胞 大鼠蛋白磷酸酶(PP)elisa分析含量试剂盒 Rat Protein Phosphatase ELISA Kit 山羊白介素10(IL-10)elisa分析检测试剂盒 小鼠维生素A(VA)elisa分析酶联试剂盒
产品描述

商品属性:

产品名称

人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记;293T-GFP

英文名称

293T-GFP

产品货号

AXB10713

培养条件

气相:95%空气+5%二氧化碳;

生长特性

贴壁生长

细胞形态

上皮细胞样

产品种属

冻存条件

无血清冻存液,液氮储存

组织来源

用途

仅供科研研究实验

商品详情:

细胞别称;293T-GFP;人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记;人胚肾细胞-GFP

种属来源;人

组织来源;肾

生长特性;贴壁生长

细胞形态;上皮细胞样

细胞代数;10代以内

背景简介;Luciferase 293T细胞稳定表达绿色荧光蛋白标记。可用作绿色荧光蛋白标记活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。293细胞株插入SV40 T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T

STR位点;Amelogenin:XCSF1PO:11,12D13S317:12,14D16S539:9,13D18S51:17,18D21S11:28,30.2D3S1358:15,16,17D5S818:8,9D7S820:11D8S1179:12,14FGA:23PentaD:9,10PentaE:7,15TH01:7,9.3TPOX:11VWA:16,19

生物等级;1

细胞规格;1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测;无

保藏机构;ATCC; CRL-3216 DSMZ; ACC-635;中国典型培养物保藏中心细胞库

培养基;90% DMEM+10% FBS+PS+1. 0ug/ml puro

培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37

冻存条件;无血清冻存液,液氮储存



细胞培养操作:

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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