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产品资料

人皮肤成纤维细胞(国内建系永生化处理);HDF-SV40T

人皮肤成纤维细胞(国内建系永生化处理);HDF-SV40T
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  • 产品名称:人皮肤成纤维细胞(国内建系永生化处理);HDF-SV40T
  • 产品型号:AXB10295
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
人皮肤成纤维细胞(国内建系永生化处理);HDF-SV40T公司正在出售的产品:CAL 51人乳腺癌细胞 大鼠D二聚体(D2D)elisa含量试剂盒 小鼠剪接因子3B亚基3(SF3B3)elisa检测试剂盒 血清蛋白提取试剂盒100T 小鼠碳酸酐酶Ⅸ(CA9)elisa酶联试剂盒
产品描述

商品属性:

产品名称

人皮肤成纤维细胞(国内建系永生化处理);HDF-SV40T

英文名称

HDF-SV40T

产品货号

AXB10295

培养条件

气相:95%空气+5%二氧化碳;

生长特性

贴壁生长

细胞形态

成纤维样细胞

产品种属

冻存条件

无血清冻存液,液氮储存

组织来源

皮肤

用途

仅供科研研究实验

商品详情:

种属来源;人

组织来源;皮肤

生长特性;贴壁生长

细胞形态;成纤维样细胞

背景简介;皮肤指身体表面包在肌肉外面的组织,是人体大的器官,主要承担着保**体、排汗、感觉冷热和压力等功能。皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。成纤维细胞属于由中胚层分化而来的间质细胞。由于这些细胞非常容易培养,它们已经被广泛用于细胞和分子生物学研究中。一般而言,成纤维细胞能够分泌 I 型和 III 型胶原等细胞外基质,并且研究表明不同器官中的成纤维细胞有显著的不同。伤口修复时,真皮成纤维细胞由可增殖,可迁移的表型变为有收缩性的,可重塑基质的表型,同时,它们会分泌大量的透明质酸来应对修复时的炎症反应。该细胞通过慢病毒转染的方式携带 SV40 基因。

细胞规格;1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测;无

培养基;HDF-SV40T细胞完全培养基

培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37

冻存条件;无血清冻存液,液氮储存



细胞培养操作:

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操���步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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