细胞系实验步骤:
一、细胞培养准备:
生物柜的使用:确保所有接触细胞的物品都在生物柜中通过紫外,防止污染。
培养皿和培养瓶:提供细胞生长的环境,保持恒定的温度(通常为37℃)。
培养基和血清:特制的培养基包含各种营养物质,如糖、氨基酸和维生素,添加胎牛血清和双抗以提供生长因子和防止污染。
二、细胞培养过程:
细胞接收与记录:记录细胞系的相关信息,包括背景信息、传代培养、冷冻保存等。
细胞形态观察:定期检查细胞的形态和行为,确保细胞状态健康,无污染。
细胞传代:当细胞密度超过80%时进行传代,注意消化时间和条件,避免细胞损伤。
三、细胞系鉴定与维护:
细胞系鉴定:通过STR图谱确定细胞的遗传特征,防止细胞系被误认或交叉污染。
细胞保存与管理:定期进行细胞冷冻保存,确保细胞的长期存活和可用性。
本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO
商品属性:
产品货号
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AXB10707
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冻存条件
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详见说明
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产品分类
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人细胞系
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产品种属
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人
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生长特性
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贴壁生长
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细胞形态
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上皮细胞样
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英文名称
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NCI-N87-EGFP-LUC
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组织来源
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胃
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商品介绍:
细胞别称;NCI-N87-EGFP-LUC;人胃癌细胞-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记;NCI-N87-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记
种属来源;人
组织来源;胃
生长特性;贴壁生长
形态特征;上皮细胞样
特别注意;NCI-N87-LUC-EGFP细胞培养过程中会长空泡,属于正常现象
puro药筛浓度;NCI-N87细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中建议使用0.2ug/ml浓度puro维持
背景简介;NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72, 并且没有多巴胺���羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌受体。
它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc, L-myc, myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B 2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达: N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 或胃泌释放肽。据报道NCI-N87 细胞的植板率为4.3%。Luciferase NCI-N87细胞稳定表达萤火虫荧光素酶和绿色荧光蛋白。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。NCI-N87细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
STR位点;Amelogenin:X,Y;CSF1PO:8,12;D13S317:8,11;D16S539:9,13;D18S51:17;D19S433:14,14.2;D21S11:30;D2S1338:23,24;D3S1358:14;D5S818:12,13;D7S820:10,11;D8S1179:14;FGA:20,21;TH01:9;TPOX:9,11;vWA:15,16;
保藏机构;ATCC; CRL-5822;中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
产品规格;1x106cells/T25细胞培养瓶
培养基;90%RPMI-1640+10%FBS
培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
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培养注意事项 :
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
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