细胞系实验步骤：
一、细胞培养准备： 生物柜的使用：确保所有接触细胞的物品都在生物柜中通过紫外，防止污染。 培养皿和培养瓶：提供细胞生长的环境，保持恒定的温度（通常为37℃）。 培养基和血清：特制的培养基包含各种营养物质，如糖、氨基酸和维生素，添加胎牛血清和双抗以提供生长因子和防止污染。 二、细胞培养过程： 细胞接收与记录：记录细胞系的相关信息，包括背景信息、传代培养、冷冻保存等。 细胞形态观察：定期检查细胞的形态和行为，确保细胞状态健康，无污染。 细胞传代：当细胞密度超过80%时进行传代，注意消化时间和条件，避免细胞损伤。 三、细胞系鉴定与维护： 细胞系鉴定：通过STR图谱确定细胞的遗传特征，防止细胞系被误认或交叉污染。 细胞保存与管理：定期进行细胞冷冻保存，确保细胞的长期存活和可用性。
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商品属性：
产品货号
AXB10179
冻存条件
无血清冻存液，液氮储存
产品分类
人细胞系
产品种属
人
生长特性
悬浮生长
细胞形态
多个细胞聚团
英文名称
NCI-H146
组织来源
转移灶：骨髓
商品介绍：
种属来源；人
年龄性别；59岁，男
组织来源；转移灶：骨髓
生长特性；悬浮生长
细胞形态；多个细胞聚团
细胞代数；10代以内
细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测；无
培养基；1640+10%FBS+1%PS+1%谷氨酰胺+1%丙酮酸钠
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件；无血清冻存液，液氮储存
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培养注意事项 ： 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。 4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议 1：2 传代 。 9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。