商品属性:
产品名称
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小鼠白血病细胞;L6565
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英文名称
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L6565
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产品货号
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AXB10352
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培养条件
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气相:95%空气+5%二氧化碳;
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生长特性
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悬浮细胞
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细胞形态
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母细胞样
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产品种属
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小鼠
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冻存条件
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无血清冻存液,液氮储存
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组织来源
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器官
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用途
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仅供科研研究实验
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细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品详情:
细胞别称:L6565、小鼠白血病克隆细胞系
种属来源:小鼠
年龄性别:不详
组织来源:器官
生长特性:悬浮细胞
细胞形态:母细胞样
背景简介:L6565细胞源自L6565白血病小鼠的脾细胞悬液。L6565细胞染色体数从38-144不等;电镜观察证明,L6565细胞核边界清晰,细胞质中Oragnalles、A类、C类病毒颗粒丰富,细胞c-myc和c-fos过量表达。L6565细胞克隆是一株含有RNA病毒的细胞白血病干细胞
生物等级:1
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:
保藏机构:
培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
倍增时间:
STR鉴定位点18-3:17,18;6-7:12,13;5-5:14;X-1:25;1-2:17,18;7-1:24.2,25.2;8-1:16,17;1-1:14,15;19-2:13;15-3:19.3,20.3,24.3;12-1:17,18;6-4:16;4-2:19.3,21.3;3-2:13,15;2-1:9;13-1:16.2;11-2:16;17-2:13,14;
公司正在出售的产品:
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小鼠白血病细胞;L6565小鼠黄嘌呤脱氢酶(XDH)elisa检测试剂盒 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)elisa分析检测试剂盒
类固醇脱氢酶样蛋白1抗体 HSDL1
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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