小鼠肾集合管细胞(SV40转化)；M-1

商品属性：

细胞培养操作：

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

商品详情：

细胞别称；M-1；小鼠肾集合管细胞（SV40转化）

种属来源；小鼠

组织来源；肾

生长特性；贴壁生长

细胞形态；上皮细胞样

背景简介；M-1细胞源于tg(SV40E)Bri7转基因小鼠的正常肾组织，含SV40病毒的DNA序列，保留了皮质集合管的某些特性，如形态和CCD（皮质结合管）抗原。大多M-1细胞的克隆具有皮质集合管中闰细胞或主细胞的特征；5%~10%的细胞有闰细胞和主细胞的双重表型。当该细胞在渗透性支持物上生长时，可形成具有负跨膜电位差的腔样结构。

使用权限；A类

保藏单位；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心

细胞代数；10代以内

细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测；无

培养基；D/F12+10% FBS+PS

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件；无血清冻存液，液氮储存

Minibrain       1号染色体开放阅读框21抗体

C1orf21       组织IKKβ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

F-12营养培养基 500ml       Minibrain 抗体

土壤铵态氮测试盒       蛋白激酶N2抗体

CCL16/LEC       辣椒素受体5抗体  Anti-TRPV5

人广谱细胞角蛋白(P-CK)elisa分析检测试剂盒       大鼠环加氧酶1(COX-1)elisa分析检测试剂盒

PKN2      巨噬细胞炎性蛋白16抗体

细胞色素b245轻链抗体  Anti-p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain       卷曲螺旋结构域蛋白139抗体  Anti-PUS10/CCDC139Rabbit Anti-Human IgA / Cy5.5       EMC9蛋白抗体

双特异性磷酸酶抗体12抗体       DUSP12

磷酸化酪氨酸蛋白激酶Fyn/步原基因抗体  Anti-phospho-SLK/FYN (Tyr530)       Cy5.5标记的兔抗人IgA

EMC9       人白介素18结合蛋白(IL-18BP)elisa分析检测试剂盒

HumanIL-18BP检测试剂盒       猪骨形成蛋白2(BMP-2)elisa分析检测试剂盒

BMP-2检测试剂盒       猴子α1微球蛋白(α1-MG)elisa分析检测试剂盒

小鼠肾集合管细胞(SV40转化)；M-1α1-MG ELISA Kit       人肺炎衣原体(Cpn)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒

组蛋白去甲基化酶赖氨酸MINA抗体       MINA53

细胞传代培养操作步骤：
（1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。
（2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。
（3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。
（5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。
（7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
（9）细胞冻存。

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