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细胞冻存实验操作步骤
操作步骤：
1.用移液器吸走原培养基，加入适量PBS洗1-2遍；
2.消化细胞：加入适量胰酶，置于培养箱中37°C消化（10厘米大皿中加入1ml 0.25%的胰酶，消化4-5min，注意不同细胞消化时间不同，终止消化截点为镜下观察80%-90%以上的细胞变圆）；
3.待消化到位后加入胰酶2倍体积的完全培养基终止消化，800-1000rpm离心3-5min；
4.准备好冻存管，标记上日期，细胞类别，人名，代数，待细胞离心后去上清，加入冻存液重悬，每管1-1.5ml,转移到冻存管中；
5.将冻存管放入程序降温盒中，-80度过夜，然后转移到液氮中保存。

注意事项：
1、  细胞加入冻存液之后立即放入-80度保存，勿常温放置太久
2、 冻存细胞储存在-80度中通常不建议超过半年，液氮中通常不建议超过2年。
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