荧光定量PCR实验中的空白对照
1、无模板空白对照
NTC是指不含有模板(阳性模板或者阴性模板)的对照。目前的试剂盒的NC一般都是水或阴性缓冲液,所以NC等同于NTC。其实两者有不同的作用。
2、仪器空白对照
NTC是含有引物探针和反应液主要监控引物探针,反应体系有没有被污染。这里的仪器空白对照我通常使用的是空反应管来监控仪器有无非特异性的荧光信号。
3、荧光染料对照
zui 常使用的是ROX染料,由于荧光定量PCR的荧光信号在每个样品孔会有微小的差异所以使用特定的ROX荧光染料,系统可以根据ROX荧光染料的信号值来校准每孔的荧光信号。