PrimaCell™人椎间盘髓核细胞试剂盒培养

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服务描述：

公司提供委托细胞培养服务，细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外模型系统和调节特定基因的遗传功能。

发货：

客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、公司科技售后服务标准。

保存和应用：

客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研。

实验要点及说明：
1．产品名称本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为玻璃**，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。 

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
攀登鱼藤异黄酮 HPLC≥98% 5mg protein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISA试剂盒兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

泡桐素 HPLC≥98% 5mg PROTEINASEK酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50

霹雳萝芙辛碱 HPLC≥98% 5mg pSHTLE+目的基因腺病毒穿梭载体

啤酒甾醇 HPLC≥98% 5mg pSilencer-NEO+SiRNASiRNA表达

匹西狄醇A HPLC≥98% 5mg PUREBRANE护手露10毫升/瓶

葡萄醇 D HPLC≥98% 5mg PVELISA试剂盒鱼卵黄高0蛋白规格：96T/48T

蒲公英赛酮 HPLC≥98% 5mg PVP封片液10毫升

齐墩果酸乙酸酯 HPLC≥98% 5mg pYES+目的基因酿酒酵母表达

千层塔烯二醇，锯齿石松烯二醇，山芝烯二醇 HPLC≥98% 5mg pZERO+目的基因克隆基因

千金藤碱 HPLC≥98% 5mg pZERO载体克隆鉴定试剂盒20
PROTEASE酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50 欧奕二烯酮 B HPLC≥98% 5mg

protein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISA试剂盒兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 攀登鱼藤异黄酮 HPLC≥98% 5mg

PROTEINASEK酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50 泡桐素 HPLC≥98% 5mg

pSHTLE+目的基因腺病毒穿梭载体 霹雳萝芙辛碱 HPLC≥98% 5mg

pSilencer-NEO+SiRNASiRNA表达 啤酒甾醇 HPLC≥98% 5mg

PUREBRANE护手露10毫升/瓶 匹西狄醇A HPLC≥98% 5mg

PVELISA试剂盒鱼卵黄高0蛋白规格：96T/48T 葡萄醇 D HPLC≥98% 5mg

PVP封片液10毫升 蒲公英赛酮 HPLC≥98% 5mg

pYES+目的基因酿酒酵母表达 齐墩果酸乙酸酯 HPLC≥98% 5mg

pZERO+目的基因克隆基因 千层塔烯二醇，锯齿石松烯二醇，山芝烯二醇 HPLC≥98% 5mg
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