小茴香染料法PCR鉴定试剂盒

产品运输：低温运输

产品保存：常温

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

1 30倍浓缩洗涤液      20ml×1瓶

2 酶标试剂                 6ml×1瓶

3 酶标包被板              12孔×8条

4 样品稀释液              6ml×1瓶

5 显色剂A液               6ml×1瓶  

6 显色剂B液               6ml×1/瓶  

7 终止液                     6ml×1瓶

8 标准品                     0.5ml×1瓶

9 标准品稀释液           1.5ml×1瓶

10 封板膜                   2张

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.小茴香染料法PCR鉴定试剂盒加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

1,4-双(基硅基)-1,3-丁二炔(>99.0%(GC))  1,4-Bis(trimethylsilyl)-1,3-butadiyne  质量规格：>99.0%(GC) 英文名称MouseTIMP-1ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)规格：96T/48T

1-代丁炔(含稳定剂铜屑)(>98.0%(GC))  1-Butynyl Iodide (stabilized with Copper chip)  质量规格：>98.0%(GC) 酵母菌DOBA培养基100毫升

3-氯-1-丁炔(>98.0%(GC))  3-Chloro-1-butyne  质量规格：>98.0%(GC) ELISAKitiNV人套膜蛋白规格：48T/96T

2,4-己二炔-1,6-二醇(>99.0%(GC))  2,4-Hexadiyne-1,6-diol  质量规格：>99.0%(GC) 小鼠蛋酸酶(PP)ELISA试剂盒 ，英文名： PP ELISA Kit

10,12-二十五碳二炔-1-醇(>98.0%(GC))  10,12-Pentacosadiyn-1-ol  质量规格：>98.0%(GC) 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA检测试剂盒RatBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit 96T/48T

1-代戊炔(>97.0%(GC))  1-Pentynyl Iodide  质量规格：>97.0%(GC) 人白介素10(IL-10)试剂盒 Human IL-10 ELISA KIT

1-代-1-丙炔(>97.0%(GC))  1-Iodo-1-propyne  质量规格：>97.0%(GC) 英文名称MouseacetylcholineELISAKit小鼠乙酰胆碱(ACh)规格：96T/48T

1-(基硅基)-1-丙炔(>98.0%(GC))  1-(Trimethylsilyl)-1-propyne  质量规格：>98.0%(GC) pPICZ+目的基因毕赤酵母表达

22-二十三碳烯酸(>95.0%(GC)(T))  22-Tricosenoic Acid  质量规格：>95.0%(GC)(T) rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISA试剂盒兔子促肾上腺皮质(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

10-十一碳炔酸(>95.0%(T))  10-Undecynoic Acid  质量规格：>95.0%(T) 小鼠蛋白酪酸0酸酶受体O(PTPRO)ELISA试剂盒 ，英文名： PTPRO ELISA Kit
组织MET激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  17-Hydroxy-1a,2a-methylenepregna-4,6-diene-3,20-dione acetate  2701-50-0  中文名：  分子式：C24H30O4  度：98.0%  关键词： 

组织MEK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  17α-Estradiol  中文名：17α-雌二醇  分子式：C18H24O2  度：99.0%

组织MAPKAPKINASE5激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名：  分子式：C36H56O13  度：%  关键词：  强心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

组织MAPKAPKINASE3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式：C26H30O3  度：98.0%

组织MAPKAPKINASE2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  18-Hydroxytritriacontan-16-one  97191-42-9  中文名：  分子式：C33H66O2  度：98.0%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
0  H-D-Pro-OBzl.HCl  25g  Pheretima地龙LAMP鉴定试剂盒 

0  H-D-Pro-OBzl.HCl  5g  Radix angelicae pubescentis独活LAMP鉴定试剂盒 

0  H-D-Pro-OtBu.HCl  25g  Flos caryophylli丁香LAMP鉴定试剂盒 

0  H-D-Pro-OtBu.HCl  5g  Cortex eucommiae杜仲LAMP鉴定试剂盒 

0  H-D-Thr-OBzl  100g  Cortex lycii地骨皮LAMP鉴定试剂盒

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