产品属性：
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产品名称
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尿素快速检测试剂盒
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检测下限
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0.05%
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规格
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50样/盒
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货号
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BJ-019606
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【样本前处理步骤】
样本处理前须知 产品仅用于科研
处理任何样本时,都必须注意:
(1) 实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头(2)实验前须检查各种实验器具是否干净,必要时对实验器具进 行清洁,避免污染干扰实验结果。
(a)组织样品处理方法:
1、 称取5±0.05g组织样品于50ml离心管中,先加入3ml已稀释好的样品提取液震荡2min;再加入10ml乙腈,充分震荡5min,
2、 加入2g中性氧化铝;震荡2min ,室温4000r/min以上,离心10min;;
3、 取6ml上清液于干净离心管中,加入5ml二氯甲烷震荡3min ,室温4000r/min以上,离心10min;;
4、 取下层清澈液体于玻璃管中,加入20ul氧化剂混匀,在56℃条件下氮气或空气流吹至完全干燥;
5、 加入1ml复溶液,充分溶解干燥残留物。
6、 取100ul 上清液与100ul 已稀释好的复溶液充分混合30s,
7、 取50ul进行分析。
样本稀释倍数: 1倍
(b)水样品处理方法:
1、取50ul 上清液与450ul 已稀释好的复溶液充分混合30s,
2、取50ul进行分析。
样本稀释倍数:10倍
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操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
尿素快速检测试剂盒5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。
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