TSKgel Protein C4-300色谱柱 是一款适合于蛋白分析的反相色谱柱。采用3µm的硅胶填料,通过对孔径、固定相配体的烷基链长及表面键合密度的优化,可实现高分辨率和高回收率的分析。温度对分析结果的影响比较大,测定时温度越高,分辨率也越高。
在蛋白分析中,使用0.05%的TFA或5mmol/L的高氯酸作为离子对试剂,是比较合适的。
TSKgel Protein C4-300与其他色谱分离模式(尺寸排阻、离子交换)相结合,可以获得关于蛋白质、多肽样品的更多信息。
TSKgel Protein C4-300 色谱柱基本信息
色谱柱基质
硅胶
平均粒径
3 µm
孔径
300Å
比表面积
100 m2/g
表面官能团
C4(丁基)
封端
有(**基硅烷)
碳含量
3%
色谱柱尺寸
4.6 mmI.D. ×5 cm、10 cm、15 cm 2.0 mmI.D. ×5 cm、10 cm、15 cm
保护柱
3.2 mmI.D. ×1.5 cm 2.0 mmI.D. ×1 cm
TSKgel Protein C4-300色谱柱的主要特点:
1、高分辨率 采用了3µm粒径的硅胶→更高的理论塔板数; 孔径为30nm→非常适合于蛋白质分离的孔径尺寸。
2、高回收率 优化了固定相配体的烷基链长度以及表面密度→抑制了蛋白质的吸附。 键合官能团烷基链长的优化
通过优化官能团表面键合密度,不仅提高了该产品的分辨率,同时也提高了新色谱柱的使用寿命。
蛋白质的分析实例(单克隆抗体的分析) 利用木瓜蛋白酶(蛋白消化酶)酶解鼠源单克隆抗体使其片段化,并通过尺寸排阻色谱法(SEC)及反相色谱法(RPC)进行分析。
分析结果:
实验结果表明:即使在SEC分析的同一组分(100 kDa、50 kDa)中,仍然含有多 种疏水性不同的组分。