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Pfu DNA Polymerase
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Pfu DNA Polymerase
产品资料
Pfu DNA Polymerase
如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
Pfu DNA Polymerase
产品型号:
JX033
产品展商:
晶欣生物
产品文档:
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简单介绍
Pfu DNA Polymerase简称Pfu酶,是最常用的高保真DNA聚合酶之一。 Pfu DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Pyrococcus furiosus的高度热稳定的DNA聚合酶。Pfu酶的分子量为90kDa。Pfu酶可以催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。和Taq酶不同,Pfu酶有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity)。另外,Pfu酶有5'至3'外切酶活性,但Pfu酶没有反转录酶活性。 由于Pfu酶有3'至5'的外切酶活性,因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低,出错率为2.6×10-6 per nt per cycle。Pfu的出错率不仅远远低于Taq酶,也低于一些其它的高保真DNA聚合酶例如Vent、DeepVent、Pwo、Tli等,因此Pfu酶通常作为首先的高保真DNA聚合酶。
产品描述
Pfu DNA Polymerase简称Pfu酶,是最常用的高保真DNA聚合酶之一。
Pfu DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Pyrococcus furiosus的高度热稳定的DNA聚合酶。Pfu酶的分子量为90kDa。Pfu酶可以催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。和Taq酶不同,Pfu酶有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity)。另外,Pfu酶有5'至3'外切酶活性,但Pfu酶没有反转录酶活性。
由于Pfu酶有3'至5'的外切酶活性,因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低,出错率为2.6×10
-6
per nt per cycle。Pfu的出错率不仅远远低于Taq酶,也低于一些其它的高保真DNA聚合酶例如Vent、DeepVent、Pwo、Tli等,因此Pfu酶通常作为首先的高保真DNA聚合酶。
来源:
本Pfu DNA Polymerase为recombinant Pfu DNA Polymerase,通过大肠杆菌表达纯化获得,和纯化获得的天然Pfu DNA Polymerase在各方面的性质相同。
用途:
高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、双平端PCR克隆等。
Pfu酶扩增出来的DNA片断为双平端,可以用于双平端克隆,但不能用于常规的T载体克隆。
dUTP和dITP或含有dUTP和dITP的引物不能用于Pfu酶介导的PCR扩增反应。
活性定义:
One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a polynucleotide fraction(adsorbed on DE-81)in 30 min at 72℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 20 mM Tris-HCl(pH 8.8 at 25℃), 2 mM MgSO
4
, 10 mM (NH
4
)
2
SO
4
, 10 mM KCl, 0.1% (v/v)Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [
3
H]-dTTP.
纯度:
不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:
20 mM Tris-HCl(pH 8.2), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) Nonidet P40, 0.1% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
10×Pfu Buffer(with Mg
2+
):
200 mM Tris-HCl(pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH
4
)
2
SO
4
, 20 mM MgSO
4
, 100 mM KCl, 1% (v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA.。
失活或抑制:
酚氯仿抽提可以使Pfu酶失活。
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