合成除虫菊酯检测试剂盒说明书
(中文说明书仅供参考,请以英文为准)
适用
Abraxis合成除虫菊酯检测试剂盒适用于定量检测水样中(底下水,表面水,井水)苄氯菊脂和相关的合成除虫菊酯(见后面的交叉反应表)。水样的前处理步骤请看说明书。如果要检测土壤,作物,和食品样品的话请联系本公司索取相关资料。
原理
Abraxis合成除虫菊酯检测试剂盒应用了酶联**检测原理测定苄氯菊脂和相关的合成除虫菊酯。测试样品和包被有合成除虫菊酯特异性抗体的磁性颗粒一起加入到一次性测试管中孵育20分钟。然后添加合成除虫菊酯酶结合物。样品中的合成除虫菊酯和合成除虫菊酯酶结合物相互竞争于磁性颗粒上的抗体结合位点。孵育30分钟,在反应中磁场应用于固定测试管中的顺磁颗粒(指结合合成除虫菊酯和酶标苄氯菊脂复合物的磁性颗粒,和它们的初始浓度成正比),同时允许把没有结合的试剂处理掉。在倒掉没有发生反应的试剂后用洗液清洗这些颗粒。通过添加酶底物(过氧化氢)和显色剂(TMB)可以检测到合成除虫菊酯。结合到合成除虫菊酯抗体上的苄氯菊脂酶标物催化底物/显色液混合物产了有色物质。经过30分钟的孵育,加入酸溶液终止稳定反应。因为酶标苄氯菊脂(结合物)和没有标记的合成除虫菊酯(样品)在反应中竞争于抗体位点结合,所以显色的深浅和样品中合成除虫菊酯的浓度成反比。
试剂盒组成
1、包被有合成除虫菊酯抗体的磁性颗粒。
合成除虫菊酯抗体(抗苄氯菊脂单克隆抗体)被包被于磁性颗粒上,这些颗粒悬浮于包含有保护剂和稳定剂的盐性缓冲液中。100测试,1瓶60mL。
2、合成除虫菊酯酶结合物。
HRP标记的苄氯菊脂类似物被稀释在包含有保存剂和稳定剂的盐性缓冲液中。100测试,1瓶30mL。
3、苄氯菊脂标准品
5瓶苄氯菊脂标准品(0.75、2.5、5.0、15.0 ppb),每瓶2.0 mL,保存于含有保护剂和稳定剂的甲醇溶液中。
4、对照 1瓶2ml
浓度为3.0 ppb的苄氯菊脂,保存于含有保护剂和稳定剂的甲醇溶液中。
5、稀释剂/零标准
含有保护剂和稳定剂的甲醇溶液,不含有任何可以检测到的苄氯菊脂。100检测,1瓶35mL。
6、显色溶液
含有过氧化氢和TMB的有机碱溶液。100检测,1瓶65mL。
7、终止液
0.5%的稀硫酸溶液,100检测,1瓶60 mL。
8、洗液
加防腐剂的无离子水,100检测,1瓶250mL
9、测试管
测试管,每包36支,100检测,共3包。
试剂保存和稳定剂
所有试剂都保存在2-8°C。不能冷冻保存,在有效期内试剂都可以使用。测试管不要求特定的保存条件,可以和试剂分开放。所有废弃试剂的处理可以咨询当地政府的政策法规来做适当的处理。
需要但不提供的材料
移液管:**的移液能力,可以吸取250uL和500 uL和1.0 mL反复使用的移液管。
涡旋混合机或相同功能的设备
磁性分离架
450 nm的分光光度计
甲醇(色谱级)
这些材料都可以从Abraxis得到。
样品信息
这个操作步骤推荐应用于水样。对于其他样品做检测时需要对这个步骤进行修改并通过验证。检测水样时水样应该被收集到玻璃管中,一收集到试管中就马上用色谱级的甲醇以1:1的比例稀释,以免样品吸附到试管壁上。
样品被稀释后,包含粗颗粒的样品要用滤纸过滤((e.g. 0.2 um Anotop™ 25Plus, Whatman,Inc.)来除去颗粒。如果样品中合成除虫菊酯的浓度大于15.0ppb时,这个样品要稀释后在进行测定。推荐使用1:10的稀释比例,或更大的稀释比,用零标准或样品稀释液来稀释。比如,在一个测试管中做一个10倍的稀释,加100uL的样品到900 uL的稀释液/零标准。在测试前混匀。根据测试步骤进行检查,计算结果时要乘以稀释倍数10。
以下物质浓度在达到10,000ppm时对合成除虫菊酯的检测结果也没有影响。铜,锰,钙,镁、钠,磷酸盐,硫酸盐,硫代硫酸盐和硝酸盐。1,000 ppm的氟化钠、100ppm的铜和FeSO4、10 ppm的腐植酸对检测结果也没有明显的影响。另外1M的氯化钠对检测结果也没有明显影响。
试剂准备
所有试剂在使用前都要回复到室温,包被抗体的磁性颗粒应该在使用前混匀。
注意和警惕
1、 按以上说明处理水样,按照包装盒内的说明书的检测步骤进行操作。
2、 和所有的**测定方法一样,操作手法和稳定性是测定操作的关键,对精密度有很大的影响,确保对每个测试管的测定手法一致。
3、 样品要直接添加到试管的底部,避免试剂和吸量管吸头接触。这将有助于保证混合物中试剂的一致性。
4、 添加每个样品时都要使用干净的吸头,这样可以避免交叉污染。
5、 在震荡时避免产生气泡。
6、 磁性分离架有两部分构成:这个较高的架子可以**的固定试管和一个低的分离器(这个分离器包含磁石,用于吸附包被抗体的磁性颗粒)。在孵育过程中从低的分离器上移除了较高的架子,这样可以使磁性颗粒保持悬浮.在分离步骤中这个架子和分离器被安装在一起,可以把磁性颗粒吸附到测试管的边上。
7、 为了获得*佳的测定结果,在分离步骤中一定要小心,保持每个步骤都一致。
8、 从分离器上拿起支架,慢慢翻转来倾倒测试管中的液体,动作一定要平缓保证液体是沿着试管的一边持续的流出。一直到支架反了过来的时候放在吸水垫上面使试管壁上的液体被吸出。提起来支架然后再放到吸水垫上面,反复操作几次确保试管壁上的液体全部被移除。
9、 在吸取包被抗体的磁性颗粒前要把其混均匀。
10、 标准和对照管在不使用时要把盖盖上阻止液体挥发。
11、 不要使用过期产品,避免终止液与皮肤和粘膜接触,如果不小心接触了请马上用大量的水冲洗。