采集植物样品的采集和制备
植物样品的分析结果是否有价值,首先取决于植物采样技术是否正确。植物采样技术包括各类植物样品的采集、制备和保存技术。植物样品可分为植株茎叶组织、根系、籽粒、块根、块茎、瓜果等。各类样品的采集和制备方法,随分析目的、分析项目、精度要求以及植物种类和生长条件而异,但都必须严格遵循植物采样原则,按照正确的采样技术进行样品的采集、制备和保存。
1.1植物分析的目的及采样原则
植物分析的目的可分为两类。一类是植物组织分析或植物营养诊断分析。此类分析是在植物的不同生育期于取全株或其合适部位的组织进行分析,了解植株体内各养分的累积和转化等动态阶段营养规律,研究植物对各种养分的吸收、运输和代谢规律及植株体内各养分之间的相互关系,或在植株的某一生育期采植物样进行组织分析,判断植株体内养分的丰缺状况,为合理施肥提供依据。植物分析的另一类目的是农产品品质分析。测定农产品的有关成分,评价其作为食品、饲料的营养价值或作为工业原料的品级;或是研究环境因素、栽培管理及施肥等对农产品品质的影响以及农产品在贮存过程中有关成分的变化。
植株样品的采集原则有两条:(1)样株必须有充分的代表性;(2)采样时间和部位的统一性。土壤是一个不均一体,其不均一性会造成其上所生长植物生长状况的不均一。另外,施肥、灌溉和种植等农事操作上的差异也会影响植物生长的状况的均一性。因此,要使样品有充分的代表性,其采样须符合统计学原理,即按照“多点、随机”的方法采样。
另外,同一株植物不同生育期、不同部位及同**的不同时间,植株体内各种物质有显著的差别。因此要有统一的采样时间和部位,这样分析结果才有可比性和应用价值。
1.2. 植物组织样品的采集和制备
植物组织样品多用于植物营养诊断分析,按其测定方式和所测定成分形态的不同,又可分为两类:一类是植物组织全量养分分析,另一类是测定植物组织中尚未同化而存在于汁液中的营养成分,即植物组织速测。它们在采样方法及样品制备方面,有各自的特点和不同的要求。
1.2.1 植物组织全量养分分析样品的采集和制备
植物组织全量养分分析样品的采集,首先要在统一的时间选定有充分代表性的样株。其方法通常也象采集土壤样品一样,按照一定路线(如“S”型、“X”型)在采样区内多点采样,组成混合样品。每一个混合样品的样株数目,应以作物种类、种植密度、株型大小、株龄或生育期以及要求的精密度而定。其目的是使此混合样有充分的代表性。选择样株时要注意群体密度、植株长相、长势、生育期等条件的一致;过大过小的株体,受病虫害或机械损伤的、以及田边、路、建筑物、树木等旁的植株都不应采集。但如果为了某一特定目的(如诊断缺素或毒害状况)而采样时,则应注意样株的典型性,并要同时采附近有对比意义的正常植株作为对照,使分析结果能在互比的条件下说明问题。
样株选定后,还要决定取样的部位或组织器官。原则是所选的部位或组织器官要对某种养分的丰缺*为敏感。大田作物苗期常用整个地上部分;在生殖生长开始时期常采取主茎或主枝顶部新长成的健壮叶或功能叶,幼嫩组织的养分组成变化很快,一般不宜采样。开始结实后,营养体中的养分变化很大,不宜再作组织分析。因此一般各类作物授粉后不再采营养诊断用的样品。多年生的果树和林木等植物营养诊断通常采用,‘叶分析”或不带叶柄的“叶片分析”,葡萄、棉花和一些个别果树则常作“叶柄分析”。
植物组织全量养分分析一般用烘干样品,采回的新鲜植物样品如需要分不同器官(如叶片、叶鞘或叶柄、茎、果实等部分)测定,须立即将其剪开,以免养分运转。植物样品常沾有泥土、肥料、农药等,因此样品需要洗涤,这在测定微量元素时显得更为重要。植物组织样品应在尚未萎蔫时刷洗,否则一些易溶养分(如钾、水溶性糖等)会被洗出。洗涤方法一般是先用蒸馏水冲洗,然后尽快用吸水纸擦干。洗涤擦干后的新鲜样品先在70°C鼓风干燥箱中烘干。
干燥的样品用研钵或磨样机进行粉碎,并全部通过筛。分析样品的细度须视称样的多少而定,如称样量仅为1~2g,宜过0.5mm筛;称样小于1g时,须过0.25mm筛。磨样和过筛时都应避免样品的污染,特别是需作微量元素分析的样品,应避免用铁、铜等磨或筛,样品在干燥箱中烘干时也要防止金属粉末等的污��。样品可用玛瑙、瓷研钵研碎或用玛瑙、不锈钢的磨粉碎,然后过尼龙筛。样品过筛后要充分混匀,保存于磨口的广口瓶中并且贴好标签。
样品在粉碎及贮存过程中,常会吸收一些空气中的水分。因此在精密分析工作中,称样前应把已粉碎的样品在65°C(12~24h)或90°C(2 h)再次烘干;一般常规分析时若样品吸水很少,则可不必再烘。
1.2.2 植物组织速测样品的采集和制备
植物组织速测样品的采集和植物组织全量养分分析样品的采集类似,也是要先在采样区内按照采样原则采有代表性的混合样。采样部位、时间更要严格统一。但植物组织速测是测定植物组织中尚未同化而存在于汁液中的营养成分,这些物质处于不断地转移和代谢变化之中,不仅在不同生育期的含量有很大变化,而且在一日之间也有显著差别。因此一定要用新鲜样品。取样时间通常在上午8~10时为宜。因为这时植物的生理活动已趋活跃,地下部根系吸收速率与地上部正趋于上升的光合作用强度接近动态平衡,此时植物组织中的养分贮量*能反映根系吸收与植物同化需要的相对关系,因此*具有营养诊断的意义。
采集的新鲜植物样品,可在田间直接进行测定,也可带回实验室再进行测定。测定时如果是直接压取植物组织汁液进行测定,样品可用湿布或毛刷擦净即可。如果测定时需要浸提植物组织中的未同化的营养成分,则样品需要洗涤,其方法和植物组织全量养分分析样品的洗涤方法一样。分析时将洗净的鲜样剪碎混匀后,立即用称量瓶或塑料容器称样,放在瓷研钵中加适当溶剂或石英砂研磨,进行浸提测定。鲜样如不能立即测定,则须放在冰箱中(-5°C)短期冷藏保存,以抑制其生理变化。测
定水溶糖用的新鲜样品也可用蒸汽处理后烘干保存。
1.2.3 籽粒样品的采集和制备
籽粒样品一般用于品质分析,籽粒样品有的采自个别植株,有的采自试验小区或大田地块,有的采自大批收获物。从谷类或豆类个别植株上采取的籽粒须全部留作样品。籽粒经去杂、混匀后,按四分法缩分为平均样品,但重量不应少于25g,从试验区或大田采样时,可按照植株组织样品的采样方法,选定样株收获后脱粒,混匀,用四分法缩分,取得约250g样品。大粒种子如花生、大豆、蓖麻、棉籽、向日葵、三十等可取500g左右。采样时应采完全成熟的种子,不成熟的种子其化学成分与成熟种子有明显差异。从成批收获物中取样时,在保证样品有充分代表性的原则下,可在散装堆中选点随机取样,或从包装中随机扦取原始样品,再用四分法或分样器缩分至500g左右。
将采集的籽粒样品风干、去杂和挑去不完整粒,用磨样机或研钵磨碎,使之全部通过0.5~1mm筛,贮于广口瓶中,贴好标签备用。油料作物中的大粒种子,如花生、向日葵、棉籽等应去掉厚的果壳或种皮,只分析果仁。为了防止油料作物种子在磨碎过程中损失油分,可从采取的样品中用四分法缩分出少量样品,于70~80°C干燥箱内干燥,取出,在瓷研钵中击碎,不能研磨。大豆和其它含油少的种子则可以直接用磨磨碎。
1.2.4 瓜果样品的采集和制备
“瓜果样品”,是泛指水果蔬菜中的果实、浆果、块茎、块根等。瓜果的成熟期延续很长,一般在主要成熟期采样,必要时也可在成熟过程采2~3次样品。每次应在试验区或地块中不少于10样株上采取簇位相同、成熟度一致的瓜果组成平均样品。平均样品的果数,较小的瓜果如辣椒等不少于40个;番前、洋葱、马铃薯等不少于20个;黄爪、茄子、萝卜等不少于15个;较大的瓜果如西瓜、白菜、甘蓝等不少于10个。数量多时,可以切取果实的1/4组成平均样品,总重以1.5kg左右为宜。
采集果树的果实样时,样株要挑选树龄、株型、生长势、载果量等一致的正常株,老、幼和旺长的果树都不具代表性。在同一果园同一品种的果树中选约5~10株为代表株,从每株的全部收获物中选取大、中、小和向阳及背阴的果实共10~15个组成平均样品;一般总重不少于1.5kg。
瓜果和蔬菜分析通常用新鲜样品,采回的瓜果、蔬菜样品同样需要洗涤、擦干。大的瓜果或样品数量多时,可均匀地切取其中的一部分,但要使所取部分中各种组织的比例与全部样品中的相当。将分析用的样品切成小块,用高速植物组织捣碎机(或研钵)打成匀浆,从混匀的匀浆中多点勺取称样。多汁的瓜果也可在切碎后用纱布挤出大部汁液,残渣捣碎后再与汁液一起混匀、称样。
瓜果样品如需干燥,则必须力求快速,以保存样品的成分不变。打碎的鲜样先在110~120°C的鼓风干燥箱中烘20~30min,降温后再在60~70°C烘干。