土壤全氮含量测定
一、方法原理
土壤样品用浓H2S04—催化剂加热消煮，使各种形态的氮都转化为NH4+—N，然后加碱蒸馏 ,用硼酸吸收NH3，用标准酸滴定，计算样品含N量。
主要反应：
含N化合物+H2S04———(NH4)2S04+CO2+SO2+ H20
(NH4)2S04+2NaOH——2NH3+ Na2S04+2H20
NH3+H3B03———————NH4·H2B03
2NH4·H2B03 +H2S04一(NH4)2S04+2H3B03
二、试剂
1，混合催化剂：1g硒(Se)粉，10gCuS04.5H20，100gK2S04磨细混匀。
2．浓H2S04。
3．40％NaOH：400gNaOH，加水至1000ml。
4．硼酸吸收液(2％)：60g硼酸(H3B03)溶于2500ml水，加60ml混合指示剂，用0.1mol
NaOH调节pH为4.5~5.0(紫红色)，然后加水至3000ml。
5．混合指示剂：0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红，溶于100ml乙醇。
6．0.01～0.02MOL.L-1标准酸(1/2H2SO4)：3ml浓H2S04加入10000ml水中，混匀。
标定：准确称取硼砂(Na2B204)1.9068g，溶解定容为100ml，此为硼砂溶液。取此液10ml，放人三角瓶中，加甲基红指示剂2滴，用所配标准酸滴定由黄色至红色止，计算酸浓度。
三、仪器。
开氏瓶、电炉、定N蒸馏器、滴定管(半微量)。
四、操作步骤
1．称土样(100目)0.5~1g，放入开氏瓶底。加入混合催化剂2g，加几滴水湿润，再加入
浓H2S04 5ml，摇匀。
2，在通风柜内加热消煮，至淡兰色(无黑色)后再消煮0.5~1小时。取下冷却后，加水约
50ml。
3．取20ml硼酸吸收液(2％H3B03)放人250ml三角瓶中，三角瓶置于定N蒸馏器冷凝管
下，管口浸入吸收液中。
4．开氏瓶(内有消煮液)接在定N蒸馏器上，由小漏斗加人20~25ml 40％浓度的NaOH
溶液，夹紧不使漏气。
5．通水冷凝，通蒸气蒸馏15分钟左右。在临近结束前，使冷凝管口离开吸收液，再蒸馏2分钟，并用纳氏试剂或pH试纸检查是否蒸馏完全。如已蒸馏完毕，用少量水冲洗冷凝管下
口，然后取出三角瓶。
6．用0.01 MOL.L-1标准酸溶液滴定，由兰绿色滴暮紫红色为终点。
五、计算
土壤全N(g.Kg-1)=[(V-V0)*C*14*10-3*103]/W
式中：C：标准酸浓度(MOL.L-1)。
V、Vo：分别为滴定样品和空白所用标准酸体积（ml）
14：N的摩尔质量（g/mol）
W：土样重(g)
六，注意事项：
1．土样应避免沾在开氏瓶颈部，如因颈部不干而沾丁土样，应用H2S04或少量水冲入瓶
底，否则会因消煮不到而使结果偏低或失误。
2．加入少量水湿润的目的是为了防止土与H2S04不能混匀而成团粒，不利于充分消化。
但水份多了会降低消煮温度，延长消化时间。所以不可加入太多水。可将土样在瓶底摇动散
开，然后加H2S04，这样土样不至成团粒，能与H2S04混匀。
3。消煮过程中，应摇动开氏瓶数次，让土样集中在瓶底与H2S04充分反应。消化开始时，
由于有机物炭化，溶液为棕黑色等深颜色，随有机物氧化，颜色变浅，至出现兰绿色时(此为CuS04的颜色)，大部分有机物都已分解，再消化半小时以上，使一些难转化的含氮化合物也转化为NH4+—N。如果开氏瓶内还有黑色或棕色，必须继续消化至该色消失。
4．有时某些土样消化时会有溶液溅动现象，应控制温度不使反应局部过剧烈。消化土样
也可以用硬质试管—铝锭消化器或其它定氮消煮仪器。催化剂中Se有毒，且在高温下易挥
发，消化过程中还有S02等毒气产生，所以消煮必须在通风柜内进行。
5。消化后开氏瓶内为浓H2S04，应冷却后小心加入水稀释，否则会因水与浓H2S04激烈
作用，而使消化溶液冲出，造成损失或失败。
6，如用常量蒸馏器，可将开氏瓶直接接在蒸馏器上蒸馏。如���半微量定氮蒸馏器，可将
消化溶液全部转移人lOOml容量瓶中，用水洗几次开氏瓶，洗液也转入容量瓶。用水定容后，
取10~20ml溶液加入半微量定氮蒸馏器进行蒸馏测定，*后计算时需乘上分取倍数(10~5倍)。
7．常量定氮蒸馏时，由于蒸出NH3，H20量较大，冷凝管下口(可接皮管或塑料管加长些)
应插入硼酸吸收液，避免可能有的挥发损失。*后为避免管口沽有硼酸吸收液，．所以结束前2分钟将冷凝管口离开硼酸吸收液，让蒸馏溶液<这时含NH3·H20已经很少)冲洗管内口。在取出三角瓶时，还应用水冲洗一下冷凝管下口。、如果是用半微量定氮蒸馏，由于蒸出NH3·H20量较少，一般不会有挥发损失问题，所以冷凝管口可不插入吸收液中。
8．蒸馏加入的40％NaOH的量要适宜。少了，不能完全中和浓H2S04，因此不能使NH3蒸出；过多了，反应过剧烈，容易造成氮的损失。加入的量要根据溶液中含H2S04的量来决定，如消化时用5ml浓H2S04，则蒸馏时用20~25ml40％NaOH(10N)。如用半微量蒸馏，取20ml稀释液(20ml／100ml)，则只需加5ml40％NaOH口添加NaOH的过程要快速，防止反应生成的NH3损失。
9．该测定中不包括土壤中的N03—N。如土样有较多NO3-和NO2-—N，则需加入水杨酸和Na2S203固定和还原NO3-—N、NO2-—N成为NH4+—N，然后同样进行消煮。
七、思考题
1．土样消煮时，加入的各种试剂各起什么作用?
2. 如何保证消煮完全，使全部氮都转化为NH4+—N?
3．在蒸馏过程中，哪些因素可能造成测定结果偏低?
