血清学检测是许多健康问题诊断过程中的关键检测方法，包括交叉匹配，疾丨病诊断，监测等。这些检测在临床决策中起着至关重要的作用，免丨疫分析是目前可用的强大，灵敏的血清学检测方法之一，它基于抗原抗体之间的高度特异性结合，即使在低浓度下也能进行定性和定量检测。有多种免丨疫测定方法，以下是其中常见两种检测方法示意图，分别是夹心法（图1A）和直接法（图1B），当选择用于夹心法检测的抗人二抗时（图1A），需要考虑一抗的种属，并使用与该物种有*小交叉反应的二抗。
图1：测定方式：A.夹心法，B.直接法
免丨疫分析在多种疾丨病诊断起重要作用
各类免丨疫测定技术各有优缺点，例如，快速测定法（如胶体金侧向流动法）可在数min 内提供定性结果，可进行即时检测，而ELISA可能需要花费数小时才能完成，但可提供定量数据。
而当前严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2（SARS-CoV-2）大流行更加凸显了侧向流动分析的优势，由于该疾丨病具有快速传播和较高的死亡率等特征，美国FDA已采取相关措施，允许各州未经FDA批准就可开展新的SARS-CoV-2检测。该修订允许使用快速检测试剂盒，该试剂盒定性检测患者针对SARS-CoV-2产生的IgG和IgM抗体，从而显著加大了SARS-CoV-2的检测能力，尽可能地减少病毒的传播。尽管侧向流动检测具有明显的优势，但这种分析方法无法提供定量的数据。
表1.几种类型的免丨疫测定法的优缺点，检测过程，检测的Ig类型
抗人二抗是各类免丨疫分析中的关键试剂
尽管免丨疫测定的功能和目的有所不同，但为了在临床上获得准确，可靠数据，开发血清学试剂盒时，高质量试剂至关重要。抗人二抗的质量是开发免丨疫测定试剂盒时的关键考虑因素，二抗需要谨慎选择，因为它们会结合一种一抗的多个表位上，从而增强了信号的灵敏度和选择性。表2总结了在进行免丨疫测定选择合适的二抗时需要考虑的多个方面。
表2.在免丨疫分析中选择合适的二抗时的考虑因素以及我们抗体的特征
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Note：Bov：牛；Hrs：马；Ms：小鼠；Rb：兔子；Sr Prot：血清蛋白
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